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放射性标记的探针与固定在膜上的核酸的Southern杂交
原理Southern 杂交获得的信号强度取决于若干因素，包括固定的 DNA 与探针互补的比例、探针的大小及特异活性以及转移到膜上的基因组 DNA 的数量。在最佳
2024-05-20 76 -
琼脂糖凝胶栓中DNA的限制性内切核酸酶消化
原理从哺乳动物细胞、酵母或细菌分离的染色体 DNA 在琼脂糖栓中可用所需的内切酶消化。低熔点琼脂糖栓的孔足以使内切酶进入，与作为底物的基因组 DNA 相作用。消
2024-05-20 69 -
通过超滤去除DNA扩增产物中的寡核苷酸及过剩dNTP
原理PCR 反应结束后，从扩增 DNA 产物中去除扩增反应残余下来的寡核苷酸引物，引物二聚体及 dNTP 是非常必要的。首先，DNA 扩增目的产物内残余的 dN
2024-05-20 89 -
PCR产物的平末端克隆
原理靶基因经 PCR 扩增，样品进行必要的纯化回收后，接下来用平末端进行连接克隆也是分子生物学实验中常规采用的技术路线，实验一般利用噬菌体 T4 DNA 聚合酶
2024-05-20 120 -
克隆化的PCR产物连入T载体
原理由 Taq DNA 聚合酶 PCR 扩增产生的带 3' 突出端为 A 碱基的 DNA 片段能高效地克隆至 T 载体上，这种 T 载体有与 A 碱基互
2024-05-20 151 -
脉冲场凝胶电泳制备DNA（酵母完整DNA的分离）
原理制备用于电泳的酵母 DNA，先用酶破坏酵母细胞胞壁，然后在熔化的低熔点琼脂糖中混悬，制成栓。将栓浸入含蛋白酶的裂解缓冲液，以加速细胞裂解和除去蛋白质。此方法
2024-05-20 78 -
脉冲场凝胶电泳制备DNA（哺乳动物细胞和组织DNA的分离）
原理本方案叙述了从培养细胞和组织制备 DNA 样品的方法。病人或动物来源的白细胞也能用作 PFGE 的高分子质量 DNA 样品。如果确有必要，DNA 也可以从哺
2024-05-20 70 -
聚丙烯酰胺凝胶中DNA片段的回收（压碎与浸泡法）
原理从聚丙烯酰胺凝胶中回收 DNA 的标准方法是由 Maxam 和 Gilbert (1977) 最先介绍的“压碎与浸泡”技术。洗脱下来的 DNA 通常不含有酶
2024-05-20 90 -
聚丙烯酰胺凝胶中DNA的放射自显影检测
原理丙烯酰胺凝胶电泳分离的放射性 DNA 条带可用放射自显影的方法检测。含有放射性 DNA 的聚丙烯酰胺分析凝胶，在放射自显影前通常要固定和干燥。然而，若要从凝
2024-05-20 97 -
低熔点琼脂糖凝胶中DNA的回收（用琼脂糖酶消化）
原理可用琼脂糖酶消化的方法从低熔点琼脂糖凝胶中回收 DNA ( Bumeister and lehrach 1989)。在这种方法中，琼脂糖酶使琼脂糖多聚体水解
2024-05-20 71 -
长距离PCR
原理在标准 PCR 反应条件下，PCR 扩增 DNA 片段的长度一般为 1~2 kb，这种扩增能力对许许多多常规的 DNA 分子操作技术要求来说是已经足够了（如
2024-05-20 71 -
cDNA宏阵列方法分离拟南芥的臭氧应答基因实验
材料与仪器步骤##一、 cDNA 宏阵列的样品制备培养基： I : 2 (V7 V ) Gamborg B5 培 养 基（GibcoBRL， Rockville
2024-05-20 75 -
用交换反应进行5'突出端DNA分子的磷酸化
原理T4 噬菌体多核苷酸激酶催化的交换反应（Van de Sande et al. 1973; Berkner and Folk 1977) 是一个标记 5&#
2024-05-20 78 -
锚定酶消化cDNA实验
材料与仪器溶液与缓冲液 引物试剂盒 MPC-E PCR仪 Gene PulserII 型系统步骤实验方案 A1.通过加入下列物质来消化双链 cDNA2.在 37
2024-05-20 81 -
通过 cDNA宏阵列和基因表达谱检测 环境毒物的毒理效应实验
材料与仪器步骤一.材料1.扩增和制备克隆（1）甘 油 保 存 的E.coli, 质 粒 含 有 目 标 cDNA 插入片段。（2）Tag 聚合酶和缓冲液（New
2024-05-20 64
