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如何做好DNA转染实验?
我认为,要想做好质粒DNA细胞转染实验,应注意以下几点:1, 质粒的大小和质量线性化还是超螺旋会影响转染结果:超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多,特别是瞬时
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为什么我的细胞转染效率低?
1)优化条件:质粒不同,所转染的细胞不同及定量的准确性等因素会导致在一些情况下所做的转染不在该优化条件内。这种情况下需要对质粒转染试剂的配比进行优化。另外,可选
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怎样提高悬浮细胞的siRNA转染效率?
悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面,在培养液中呈悬浮状态生长,如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染,其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。
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如何选择慢病毒和腺病毒系统?
慢病毒载体系统和腺病毒载体系统比较病毒表达系统慢病毒表达系统(Lentivirus)腺病毒表达系统(Adenovirus)病毒基因组RNA病毒双链DNA病毒复制
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关于细胞培养基你需要知道的那些事
大多数实验室购买的培养基是预先处理好的瓶装液体培养基,或者是干粉状的需要水化和过滤除菌的培养基,后者比较便宜,用量大时更有价值。由于培养基中都有酚红或其他染料p
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电转染实验影响因素
1 电场参数电场是电转染的重要因素,细胞在电场的作用下,膜通透性增加或是形成小孔,以完成转染过程。因此电场强度是应该被优化的主要参数。电场强度不能过高,过高会增
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RNA转染过程中常见问题及解决方案
RNA转染试剂Entranster-R4000使用过程中常见问题及解决方案如下:
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siRNA转染效率不佳的原因
1. siRNA与转染试剂比例不佳由于siRNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记,决定了siRNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件,建议先进
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miRNA对划痕愈合(细胞迁移)的影响
我的建议:通常来说,如果你想研究miRNA对划痕愈合(细胞迁移)的影响,建议先进行miRNA转染,等待足够的时间让miRNA发挥作用(你提到的是三天),然后再进
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使用血清时要注意哪些参数?
血清可以提供细胞生长所必需的生长因子和营养元素,某些细胞特别是转化后的细胞,对于血清的需要量是很低的,在0.5 %左右。有些细胞被“培养成“只生存在低血清浓度的
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RNA转染影响因素
1.转染试剂转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的,而且也尽量避免和质粒DNA转染混用—即使试剂本身兼容DNA和RNA转染,因RNA与DNA
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细胞转染需要注意什么事项
1.细胞密度一般来说,当细胞密度达到60%~80%时进行转染可以取得较高的转染效率,过低或过高都会影响转染效果。2.细胞状态这点非常关键,很多时候传代次数太少或
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siRNA转染实验步骤
下面以Entranster-R4000试剂为例,说一下siRNA转染步骤(24孔板)1.提前1天细胞种植贴壁细胞:提前一天将细胞种植在24孔板中,以转染时细胞汇
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细胞培养常用的抗生素有哪些?
大多数实验室使用抗生素,但是如果无菌操作技术掌握得很好,抗生素其实也不是必需的。多数抗生素在37C 时的半衰期都很短,培养基内实际的抗生素浓度要比你以为的低。细
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细胞转染实验影响因素
转染效率受多种因素影响,主要因素有下面几个:1.转染试剂不同细胞系转染效率通常不同,但细胞系的选择通常是根据实验的需要,因此在转染实验前应根据实验要求和细胞特性