法二-微生物（测定温度对微生物的影响实验）
一、简介
温度是影响微生物生长与存活的重要因素之一。当微生物处于最适生长温度时，有刺激生长的作用；不适宜的温度可以导致细菌的形态和代谢的改变或使微生物的蛋白质凝固变性而导致死亡。
本实验通过在不同温度条件下培养不同类型微生物，了解微生物的最适生长温度与最适代谢温度及最适发酵温度的差别。
二、操作方法
法二-微生物
三、原理
温度通过影响蛋白质、核酸等生物大分子的结构与功能以及细胞结构如细胞膜的流动性及完整性来影响微生物的生长，繁殖和新陈代谢。过高的环境温度会导致蛋白质或核酸的变性失活，而过低的温度会使酶活力受到抑制，细胞的新陈代谢活动减弱。每种微生物只能在一定的温度范围内生长，低温微生物最高生长温度不超过 20℃， 中温微生物的最高生长温度低于 45℃， 而高温微生物能在 45℃ 以上的温度条件下正常生长，某些极端高温微生物甚至能在 100 ℃ 上的温度条件下生长。微生物群体生长，繁殖最快的温度为其最适生长温度，但它并不等于其发酵的最适温度，也不等于积累某一代谢产物的最适温度。粘质沙雷氏菌能产生红色或紫红色色素。菌落表面颜色随着色素量的增加呈现出由橙黄到深红色逐渐加深的变化趋势，而酿酒酵母可发酵产气。
材料与仪器
大肠杆菌 嗜热脂肪芽孢杆菌 萨伏斯达诺氏假单胞菌 粘质沙雷氏菌 酿酒酵母
肉膏蛋白胨琼脂培养基 装有蛋白胨葡萄糖发酵培养基的试管（内含倒置德汉氏小管） 无菌平皿 接种环
步骤
1. 将牛肉膏蛋白脉琼脂培养基溶化倒平板
2. 取 8 套牛肉膏蛋白胨琼脂平板，在皿底用记号笔划分为四区，分别标上大肠杆菌，嗜热脂肪芽孢杆菌、萨伏斯达诺氏假单胞菌及粘质沙雷氏菌。
3. 在上述平板各个区域分别无菌操作划线接种相应的四种菌，各取两套平板倒置于 4℃、20℃、37℃ 及 60℃ 条件下保溫 24～48 h，观察细菌的生长状况以及粘质沙雷氏菌产色素量情况。
4. 在 4 支装有蛋白陈葡萄糖发酵培养基及倒置德汉氏小管的试管中接入酿酒酵母，分别置于 4℃、 20℃ 、37℃、及 60℃ 条件下培养 24～48 h， 观察酿酒酵母的生长状况以及发酵产气量。
注意事项
注意倒平板时培养基量适当增加，使凝固后的培养基厚度为一般培养基厚度的 1.5～2 倍，避免在高温（60℃）条件下培养槽生物时培养基干裂。
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