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GUS 活性的组织化学检测

2024-12-31 动植物 加入收藏
材料与仪器组织HGUS 缓冲液 磷酸盐缓冲液 乙醇溶液微量滴定板或者试管步骤1. 将组织置于新配制的 HGUS 缓冲液中(含有 X-Gulc 及其他添加物),足

材料与仪器

组织
HGUS 缓冲液 磷酸盐缓冲液 乙醇溶液
微量滴定板或者试管

步骤

1. 将组织置于新配制的 HGUS 缓冲液中(含有 X-Gulc 及其他添加物),足以完全浸没材料,试验在微量滴定板或者试管中进行。

2.  吸真空 5~10 min,然后去掉真空条件。

3. 铝箔包裹,37℃ 放置 48 h。 

4. 用 100 mmol/L 的磷酸盐缓冲液(pH 为 7.0)洗脱材料。

5. 为了清洗材料以便观察,在 25% 的乙醇溶液中孵育 15~30 min,在 50% 的乙醇溶液中孵育 15~30 min,在 75% 的乙醇溶液中孵育 30 min。

6. 最后,在 90% 的乙醇溶液中(期间更换几次)37℃ 孵育 2~4 h,或者直到所有的叶绿素去掉为止。

7. 样品可以无期限地保存在 90% 的乙醇溶液中。盖紧盖子,避光室温放置,但要经常监测乙醇的含量。


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