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细胞技术

细胞生物学实验技术

2025-03-10 细胞技术 加入收藏
细胞生物学实验技术METHODS AND TECHNIQUES第一节显微技术光学显微镜:以可见光(或紫外线)为光源。电子显微镜:以电子束为光源。一、光学显微镜(

细胞生物学实验技术

METHODS AND TECHNIQUES

第一节显微技术

光学显微镜:以可见光(或紫外线)为光源。

电子显微镜:以电子束为光源。

一、光学显微镜

(一)普通光学显微镜

1、构成:

①照明系统

②光学放大系统

③机械装置

2、原理:经物镜形成倒立实像,经目镜进一步放大成像。

3、分辨力:指分辨物体最小间隔的能力。

R=0.61λ/N.A.

其中λ为入射光线波长;N.A.为镜口率=nsinα/2,n=介质折射率;α=镜口角(样品对物镜镜口的张角) 。

思考:如何提高显微镜的分辨能力?

表一、几种介质的折射率

介质 空气 水 香柏油 α溴萘

折射率 1 1.33 1.515 1.66

显微镜的几个光学特点:

制作光学镜头所用的玻璃折射率为1.65~1.78,所用介质的折射率越接近玻璃的越好。

sin α /2的最大值必然小于1;介质为空气,镜口率一般为0.05~0.95;油镜头用香柏油为介质,镜口率可接近1.5。

普通光线的波长为400~700nm,分辨力数值不会小于0.2μm,人眼的分辨力为0.2mm,因此显微镜的最大设计倍数为1000X。


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