简并PCR

简并PCR 就是引物合成的时候 在某个位置用两种以上的碱基代替原来的单碱基渗入oligo链 合成的是一堆混和物 实际上能够起做用的在其中占一定比例 这个比例一般用简并度表示 比如agctN合成的时候最后一位用4种碱基 反应真正用的agctc，占总数的1/4 agctNN其中agctCC就占1/16 一般公司推荐3‘端尽可能少的简并 而且有效引物在总数中不能低于一定比值 简并太多宁可多设计几条引物 也有用次黄代替AGCT四种的，不过价格昂贵，一般很少用