免疫球蛋白提取技术：禽IgA提取与纯化

（一）材料与试剂配制 1．禽胆汁 2．饱和硫酸铵溶液 3．0.01Mol/L pH7.4PBS 液 4．0.10Mol/L pH6.4PBS液（0.30Mol/L NaCl） 5． DEAE52-纤维素 （二）操作方法 1．取冷藏的胆汁3Ⅹml，缓慢滴加Ⅹml饱和硫酸铵液，边加边搅拌，使成25％饱和硫酸铵液。4℃放置30min。 1． 3 000r/min离心30min，去沉淀。 2． 取上清，加饱和硫酸铵液，使成35％的饱和度，4℃放置30min。 3． 3 000r/min离心30min，弃上清。 4． 取沉淀，加0.85％NaCl液溶解，加饱和硫酸铵溶液，重复步骤3和4三次。 5． 将沉淀用0.85％NaCl液溶解，装入透析袋，以0.01Mol/L pH7.4PBS液透析。 6． 以0.01Mol/L pH7.4PBS液平衡，过DEAE52纤维柱（20×250mm）。 7． 取透析样品4ml(﹥20mg/ml蛋白浓度)加入层析柱 。以0.01Mol/L pH7.4PBS液洗脱。 8． 再用0.10Mol/L pH6.4PBS液（NaCl浓度为0.30Mol/L）洗脱，收集洗脱液。 10．浓缩洗脱蛋白液至20mg/ml，分装，低温冰箱 保存。