最新融合表达的亲和纯化小标签StrepTaq

在重组蛋白纯化的过程中，研究者常常利用融合表达的各种亲和标签，通过一步法亲和纯化的方法获得自己的目的蛋白。其中，6×His•Tag标签因其氨基酸个数少、对蛋白活性影响较小、亲和纯化方便，成为大家常用的选择。但是，His Tag并非万能标签，依然有不少使用限制因素，如：对重金属离子敏感、不适合金属离子螯和层析方法的蛋白；活性不稳定的蛋白；对蛋白纯度要求更高等。所以，研究人员仍然需要不断寻找更适合自己的亲和标签。

Novagen最新推出的Strep•Tag II 8氨基酸小标签，就是一个新选择。我们早已熟知biotin和streptavidin之间能够高度特异的结合，这种特异性结合早已广泛用于免疫或者非放标记反应中。

Novagen模拟Biotin设计了一个8个氨基酸的小标签Strep•Tag II，正好能特异的结合到streptavidin上，又再改造优化streptavidin与小标签的结合位点，使之与Strep•Tag II融合标签的结合力超出普通streptavidin约100倍，称为Strep•Tactin蛋白。当表达产物经过Strep•Tactin亲和纯化柱时，融合表达Strep•Tag II的融合蛋白高特异地结合在亲和柱上，经过反复洗涤杂蛋白后，可以用一种生物素的类似物――2.5 mM脱硫生物素，在温和的PBS或者其他生理条件缓冲系统就能彻底洗脱目的蛋白，温和条件有助于保持蛋白的活性。