小鼠卵白蛋白特异性IgG抗体(OVA-sIgG)酶联免疫分析（ELISA）
小鼠卵白蛋白 特异性IgG 抗体 ( OVA-sIgG ) 酶联免疫 分析（ ELISA ）
试剂 盒使用说明书
本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定小鼠血清，血浆及相关液体样本中 卵白蛋白 特异性IgG抗体(OVA-sIgG) 含量。
实验原理 ：
本试剂盒应用 双抗原 夹心法测定 标本 中 小鼠卵白蛋白 特异性IgG 抗体 ( OVA-sIgG ) 水平。用纯化的 卵白蛋白 特异性IgG ( OVA-sIgG ) 抗原 包被微孔板，制成固相 抗原 ，往包被 抗原 的微孔中加入 卵白蛋白 特异性IgG ( OVA-sIgG ) ，再与HRP 标记的 卵白蛋白 特异性IgG ( OVA-sIgG ) 抗原 结合，形成抗原- 抗体 - 酶标抗原复合物 ，经过彻底洗涤后 加 底物TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 卵白蛋白 特异性IgG ( OVA-sIgG ) 呈正相关。用酶标仪在 450 nm波长下测定吸光度（ OD 值）， 通过标准曲线 计算样品 中 小鼠卵白蛋白 特异性IgG ( OVA-sIgG ) 的浓度。
试剂盒组成 ：
试剂盒组成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
说明书 | 1份 | 1份 | |
封板膜 | 2片（ 48 ） | 2片（ 96 ） | |
密封袋 | 1个 | 1个 | |
酶标包被板 | 1 ×48 | 1 ×96 | 2-8℃保存 |
标准品： 900 μg /L | 0.5ml× 1 瓶 | 0.5ml× 1 瓶 | 2-8℃保存 |
标准品稀释液 | 1.5ml× 1 瓶 | 1.5ml× 1 瓶 | 2-8℃保存 |
酶标试剂 | 3 ml× 1 瓶 | 6 ml× 1 瓶 | 2-8℃保存 |
样品稀释液 | 3 ml× 1 瓶 | 6 ml× 1 瓶 | 2-8℃保存 |
显色剂A 液 | 3 ml× 1 瓶 | 6 ml× 1 瓶 | 2-8℃保存 |
显色剂B 液 | 3 ml× 1 瓶 | 6 ml× 1 瓶 | 2-8℃保存 |
终止液 | 3ml× 1 瓶 | 6ml× 1 瓶 | 2-8℃保存 |
浓缩洗涤液 | （20ml × 20 倍）× 1 瓶 | （20ml × 30 倍）× 1 瓶 | 2-8℃保存 |
样本处理及要求 ：
1.血清：室温血液自然凝固 10-20 分钟，离心 20 分钟左右（ 2000-3000 转 / 分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2.血浆：应根据标本的要求选择 EDTA 、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合 10-20 分钟后，离心 20 分钟左右（ 2000-3000 转 / 分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3.尿液：用无菌管收集，离心 20 分钟左右（ 2000-3000 转 / 分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心 20 分钟左右（ 2000-3000 转 / 分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用 PBS （ PH7.2-7.4 ）稀释细胞悬液，细胞浓度达到 100 万 /ml 左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心 20 分钟左右（ 2000-3000 转 / 分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5.组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的 PBS ， PH7.4 。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持 2-8 ℃的温度。加入一定量的 PBS （ PH7.4 ），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心 20 分钟左右（ 2000-3000 转 / 分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
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