蛋白质的透析

一、目的

学习透析的基本原理和操作。

二、原理

蛋白质是大分子物质，它不能透过透析膜而小分子物质可以自由透过。在分离提纯蛋白质的过程中，常利用透析的方法使蛋白质与其中夹杂的小分子物质分开。

三、器材 1、透析管或玻璃纸2、烧杯 3、玻璃棒4、电磁搅拌器

5、试管及试管架

四、试剂 1、蛋白质的氯化钠溶液3 个除去卵黄的鸡卵蛋清与700mL 水及300mL 饱和氯化钠溶液混合后，用数层干纱布过滤。 2、10%硝酸溶液 3、1%硝酸银溶液 4、10%氢氧化钠溶液

5、1%硫酸铜溶液

五、操作 1、用蛋白质溶液作双缩脲反应。 2、向火棉胶制成的透析管中装人10~15mL 蛋白质溶液并放在盛有蒸馏水的烧杯中(或用玻璃纸装入蛋白质溶液后扎成袋形,系于一横放在烧杯的玻璃棒上)。 3、约1 小时后，自烧杯中取水1~2mL，加10%硝酸溶液数滴使成酸性，再加入1%硝酸银溶液1~2 滴，检查氯离子的存在。 4、从烧杯中另取1~2mL 水，做双缩脲反应，检查是否有蛋白质存在。 5、不断更换烧杯中的蒸馏水（并用电磁 搅拌器 不断搅动 蒸馏 水）以加速透析过程。数小时后从 烧杯 中的水中不能再检出氯离子。此时停止透析并检查 透析袋 内容物是否有蛋白质或氯离子存在（此时应观察到 透析袋 中球蛋白沉淀的出现，这是因为球蛋白不溶于纯水的缘故）。