视神经损伤模型实验-坐骨神经移植及荧光金逆行性标记

材料与仪器

步骤

(1)-(5)与视神经横断模型及荧光金逆行标记相同，不再赘述。

(6)在眼球后极1mm处以显微剪剪断视神经。

(7)取自体大鼠一侧坐骨神经约1cm长，准备移植。

(8)采用11-0带针缝合线将坐骨神经缝合到眼球后极，然后将坐骨神经的缝合端套入视神经，使其包裹住视神经，周围垫以明胶海绵，防止视神经从坐骨神经内滑脱。

(9)将坐骨神经的另一端缝合到眼眶上缘。

(10)术毕缝合眼眶以及头皮，抗感染处理，调整头皮张力，可容双睑闭合。术中及术后观察手术侧眼底供血情况。

(11)在25d时，采用戊巴比妥钠麻醉动物，剪开头皮，找出缝合在眼眶上缘的坐骨神经，剪断末端。

(12)剪取小片封口膜并展蒲，戳一小孔，容坐骨神经通过，一小块明胶海绵浸吸5%荧光金溶液，包埋坐骨神经以逆行标记节细胞。将封口膜折叠包裹坐骨神经及明胶海绵。

(13)术后缝合头皮。

(14)3d后，注射过量戊巴比妥钠处死动物，取眼球进行视网膜铺片及全视网膜节细胞计数。

3视神经夹伤模型视神经夹伤模型在近年来被一些实验室采用,这里也一并进行介绍。

(1)-(5)与视神经横断模型极荧光金逆行标记实验相同。

(6)在眼球后极1.5mm处以5#摄子(Dumont)夹持10s。

(7)术毕缝合眼眶，以及头皮，调整头皮张力，可容双脸闭合。术中及术后观察手术侧眼底供血情况。