妊娠期肝内胆汁淤积症动物模型-小鼠构建模型

小鼠构建模型是选择小鼠为模型，于孕期肌注雌激素或同时肌注孕激素来构建模型。

材料与仪器

试剂：

① 雌、孕激素；

② 苯甲酸雌二醇注射液；

③ 黄体酮注射液；

④ 10% 中性甲醛；

⑤ 2.5% 戊二醛；

⑥ 1% 四氧化饿；

⑦ 环氧树脂 618；

⑧ 醋酸铀和枸橼酸铅。

实验动物：成年新西兰雌兔。

步骤

小鼠模型构建的基本过程可分为如下几步：

A. 雌、孕激素共同构建: 孕 15 天开始每天颈后皮下注射苯甲酸雌二醇注射液 1.25 mg/kg，黄体酮注射液 75 mg/kg，连续 5 天。孕 20 天孕鼠禁食过夜，次日摘眼球法取血查生化指标。颈椎脱臼处死，取肝右叶组织 1 mm × 1 mm × 1 mm，置于 4 ℃ 下 3 ml 2.5% 戊二醛中固定，取肝右叶组织 1 cm × 1 cm × 0.3 cm，置于 10% 中性甲醛中固定（组织与固定液中体积比为 1:30），行光镜、电镜检查。

B. 单纯雌激素构建模型

（1）孕 12 天开始肌内注射苯甲酸雌二醇，每天 0.35 mg/kg，连续 6 天。孕 17 天采用摘眼球法取血查生化指标。

（2）SD 大鼠，孕 15 天开始每天皮下注射炔雌醇 2.5 mg/kg，连续 5 天。在用药前及用药后 3 天、5 天，分别从眶静脉采全血 2 ml，分娩一只仔鼠后再用同法采血 2 ml，取血清测定各生化指标。分娩一只仔鼠后断头法处死母鼠，即行剖宫手术，观察并记录仔鼠数，包括仔鼠成活数，死胎数，仔鼠体重、身长、尾长，取肝左叶置于 10% 中性甲醛溶液（pH = 7.4）内，固定 24 小时以上，56 ℃ 石蜡包埋，连续切片 6 μm 厚，HE 染色，观察光镜下肝脏的组织学改变。在 0 ℃ 左右的工作台上取肝脏组织块 1 mm × 1 mm × 1 mm，置 2.5% 戊二醛中固定，1% 四氧化饿后固定，乙醇和丙酮递增浓度脱水，环氧树脂 618 包埋，LKB 超薄切片机切片，醋酸铀和枸橼酸铅双染色，用 JEM1200E 型电镜观察。

注意事项

用妊娠大鼠构建动物模型具有配种简便、受孕率高、繁殖周期短的优点其肝功能及总胆汁酸改变同人类妊娠期肝内胆汁淤积症有类同之处，具有较广泛的应用前景，但胎鼠体积较小，取材及操作困难，不能较好地满足对 ICP 围生儿重要脏器功能损伤的观察和研究。家兔疾病病理改变与人类接近，易繁殖，一胎多产，且胎兔体积大小适宜，利于取材操作。