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Northern Blot原理及所需仪器、试剂
一、原理:在变性条件下将待检的RNA样品进行琼脂糖凝胶电泳,继而将在凝胶中的位置转移到硝酸纤维素薄膜或尼龙膜上,固定后再与同位素或其它标记物标记的RNA探针进行
2025-01-08 -
RNA的提取方法及原理
RNA提取原理RNA提取时,加氯仿后分三层:水相(含rna,可能还有少量DNA),中间白色薄层(应该是蛋白和DNA),下层有机相(氯仿和蛋白等)氯仿是分子量比较
2025-01-08 -
PCR实验步骤及常见问题汇总
聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复
2025-01-08 -
western-blot化学发光(ECL)的特异性差怎么办
特异性差,出现杂带或非特异条带的原因可能有以下几个方面:1. 蛋白上样量过大。可降低蛋白上样量。2. 一抗是多克隆抗体,或一抗、二抗浓度太高。可更换成单克隆抗体
2025-01-08 -
昼夜节律转录因子BMAL1在生殖内分泌学和生育中的关键作用
脑和肌肉芳烃受体核转位蛋白1(BMAL1)是昼夜节律振荡的核心成分,参与了许多生理活动。越来越多的证据表明BMAL1在生殖生理学中发挥着重要作用。2022年3月
2025-01-08 -
western-blot化学发光(ECL)时,胶片上条带很浓怎么办?
可通过以下几个方面进行改进:1. 可减少蛋白上样量;2. 降低一抗二抗稀释度,减少抗体孵育时间;3. 如果背景深的话,则要把发光液沥干些再压片;如果背景不深则需
2025-01-08 -
动物基因组DNA的提取
实验原理 在EDTA和SDS等去污剂存在下,用蛋白酶K消化细胞,随后用酚抽提,可以得到哺乳动构基因组DNA,用此方法得到的DNA长度为100-150 kb,适用
2025-01-08 -
如何提高PCR反应的特异性?
1、巣式pcr(Nest-PCR)可增加稀有靶序列的灵敏度;降低了扩增多个靶位点的可能性;提高PCR特异性2、递减PCR(Touch Down PCR):前几个
2025-01-08 -
什么是反向PCR?
1、原理反向PCR(reverse PCR)是用反向的互补引物来扩增两引物以外的未知序列的片段,而常规PCR扩增的是已知序列的两引物之间DNA片段.实验时选择已
2025-01-08 -
AFLP原理和操作步骤
AFLP是通过限制性内切酶片段的不同长度检测DNA多态性的一种DNA分子标记技术。本AFLP 技术主要特点 :分析所需 DNA 量少,仅需 0.5g;可重复性好
2025-01-08 -
荧光表达的细胞在冻存后72小时后再测荧光情况,可以吗?
荧光表达后的细胞可以在冻存后72小时再测荧光,但有几点需要注意:细胞存活率:冻存和解冻过程可能会影响细胞的存活率和状态。确保细胞在解冻后恢复良好,具有正常的形态
2025-01-08 -
双脱氧法DNA 测序常见问题
问题可能原因解决方法放射自显影片空白DNA 聚合酶失活标记物太旧用对照引物、模板及试剂进行试验试剂太旧替换缺陷试剂不正确或有缺陷的引物不正确或有缺陷的模板,曝光
2025-01-08 -
Quantification of Genetically Controlled Cell Death in Budding Yeast
Yeast are the foremost genetic model system. With relative ease, entire chemical
2025-01-07 -
The Isolation of Osteoclasts from Human Giant Cell Tumors and Long-Term Marrow Cultures
The osteoclast is a large multinucleate cell formed from the fusion of mono-nucl
2025-01-07 -
细胞生物基本方法:特殊培养法
特殊培养法 1 )二倍体细胞培养法 二倍体细胞培养法与一般培养相同,关键在于传代,其传代程序为:1. 吸除旧培养液注入另瓶中。2. 用温 B
2025-01-07