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DNA实验

基于单链构象多态性检测突变基因

2024-05-18 DNA实验 加入收藏
简介英文名: single-strand conformation polymorphism, SSCP单链构象多态性分析是因为短于 400 碱基长的单链 DN

简介

英文名: single-strand conformation polymorphism, SSCP


单链构象多态性分析是因为短于 400 碱基长的单链 DNA 在聚丙烯酰胺凝胶电泳时,单一碱基的改变往往足可以影响 DNA 的构象而显示出不同的迁移率。


原理


基于单链构象多态性检测突变基因的基本原理是对目标区域的片段进行 PCR 扩增,得到相同长度 DNA 片段 原本由于双链 DNA 两个等位基因的物理性质几乎相同,单个核苷酸的改变无法用电泳进行鉴别。但在核酸变性后,单链的 DNA 进行三维折叠显示出不同构象 不同序列的两条单链 DNA 因构象的不同而可在凝胶电泳时被分离开来。


材料与仪器

样本的基因组 DNA


步骤

1) 样本基因组 DNA 的提取


2) 设计引物,PCR 扩增目标 DNA 序列


3) DNA 双链变性与凝胶电泳分离鉴定



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