限制性片段长度多态性分析 SNP 分型
简介限制性片段长度多态性检测使用限制性内切核酸酶消化的方法鉴定感兴趣区域 DNA 序列多态性。 限制性片段长度多态性检测依赖于 DNA 序列的改变发生在酶切位点
简介
限制性片段长度多态性检测使用限制性内切核酸酶消化的方法鉴定感兴趣区域 DNA 序列多态性。 限制性片段长度多态性检测依赖于 DNA 序列的改变发生在酶切位点处,常与 Southern 印迹技术联用。
原理
限制性片段长度多态性检测使用限制性内切核酸酶消化的方法鉴定感兴趣区域 DNA 序列多态性。主要依据 DNA 序列改变影响酶切位点,进而对 SNP 位点进行分型检测。
材料与仪器
样本的基因组 DNA
步骤
1)样本基因组 DNA 的提取
2)设计引物,PCR 扩增包含 SNP 的目标 DNA 序列
3)使用合适的限制性核酸内切酶进行酶切消化;
4)酶切产物使用琼脂糖凝胶电泳分离鉴定,SNP 差异会引起酶切产物的大小不同,进而进行 SNP 分型检测。