免疫比浊法检测糖化血红蛋白的应用评价

【摘　要】　【目的】探讨免疫比浊法检测糖化血红蛋白 (HbAlc) 的应用价值。 【方法】应用免疫透射比浊法和高效液相色谱法分别测定糖尿病者 (20 名) 及健康人 (20 名) 的 HbAlc水平，比较两种方法的相关性并进行不精密度分析。 【结果】两种检测方法的结果呈显著相关性 ( r = 0198，P < 0105)，不精密度分析显示免疫比浊法的CV < 5 %。 【结论】运用免疫比浊法检测 HbAlc完全能够满足临床需求，且标本处理简便，不需额外的仪器，体现了良好的应用前景。

【关键词】 免疫透射比浊; 糖化血红蛋白; 高效液相色谱

一、材料和方法

1、标 　本

来自随机抽取的我院门诊病人，其中 20 位糖尿病患者，20 位非糖尿病者，标本用 EDTA2K3 抗凝并在采集后的 24 h内进行检测。

2、仪 　器

高效液相色谱仪 (美国 BIO2RAD 公 司，VARIANT Ⅱ型)，全自动生化分析仪(瑞士Roche公司， Modular P型) 。

3、试 　剂

均为配套试剂, 其中病理质控 ( Precipath) 和正常质控 (Precinorm) 来自瑞士 Roche公司。

4、方 　法

应用免疫透射比浊法和高效液相色谱法分别测定糖尿病者 (20 名) 及健康人 (20 名) 的 HbAlc水平。其中色谱分析采用的是阳离子高效液相色谱法, 免疫比浊分析采用的是基于抗 HbAlc (肽链 N端的单克隆抗体) 的免疫竞争抑制比浊法。

5、数据分析

两种方法相关性采用线性回归分析，免疫抑制比浊法的结果按照 Roche公司提供的公式进行处理如下:

HbAlc % =〔HbAlc (g/dl) / Hb (g/dl)〕× 87.6 + 2.27

免疫比浊法不精密度分析, 分别对 Precipath 和Precinorm进行批内和日间重复性试验(n= 20) 。

二、结 　果

1、两种方法相关性分析

运用两种方法分别检测 40 份标本 HbAlc 水平(范围: 412 %～1412 %) 。以高效液相色谱法结果为 x，以免疫比浊法结果为 y 进行线性回归分析显示: y = 0.9827x - 0.1955 ( r = 0.98，P < 0.05) 。

2、免疫比浊法的不精密度试验

批内不精密度: 在同一天内，对正常质控和病理质控样本连续测定 20 次; 日间不精密度; 每天测定一次上述样本连续 20 d。分别计算均数 ()和变异系数 ( CV )，结果见表 1。

3 　讨 　论

据世界卫生组织 (WHO) 报道, 1995 年全球已确诊的糖尿病患者约 1135 亿，2000 年约115亿，预计 2010 年世界糖尿病患者将达到 2139 亿。

近年来，随着我国人民生活水平的提高以及人口老龄化的进程，我国每年约增加 100 万新的糖尿病患者，可以说糖尿病已严重地威胁着人类的健康和生活质量。在糖尿病治疗中，糖化血红蛋白水平对评价血糖总体控制、发现治疗中存在的问题以及指导治疗方案的调整均有重要的临床意义。

糖化血红蛋白 (HbAlc) 是糖基化血红蛋白中的一部分, 检测稳定的糖化血红蛋白的水平有助于评估采样前6～8 w 的血糖水平, 对于糖尿病患者 ,不能控制好血糖的水平，将大大增加病死率以及并发症的出现几率。

有关糖尿病的控制和并发症的研究表明糖化血红蛋白水平增高会加大并发症的发病风险 (视网膜病变、肾病、神经系统疾病等) ;反之，如果糖化血红蛋白水平降低将预示发生并发症的风险程度大大降低。在欧美等国家，认为对于糖尿病患者，糖化血红蛋白的水平最好控制在7.5 %以下。

由于 HbAlc 的监测对于糖尿病的管理如此重要 (有的国家的疾病管理建议对于Ⅰ型糖尿病，要每 3 m检测一次糖化血红蛋白，对于 Ⅱ型糖尿病，应该每 6 m检测一次糖化血红蛋白)，而且检测的患者平均以 15 %～20 %的比例在增长。所以选择一种可以广泛使用的，准确稳定的检测方法变得非常重要。

一直以来，应用高效液相法 ( HPLC) 检测HbAlc被认为是最稳定和准确的方法，但是由于需要额外地购置仪器，而且标本处理以及检测过程比较繁琐，不能够被广大的医院采用。同时随着糖尿病患者的越来越多，临床需要更加方便、快速的检测方法。

从以上的结果分析可以看出，Roche 免疫比浊检测 HbAlc有较好的检验重复性 ( CV < 5 %)，完全可以满足临床的需要，而且与经典的 HPLC 法的相关良好。

另外，相对于 HPLC 的需要特定的仪器，操作比较麻烦等问题，免疫比浊的应用更为简单，不需要额外添加仪器，而且结果的精密度十分良好，为医生调整糖尿病治疗方案提供确实可靠的依据。这样的优势应该会使其在未来的 HbAlc检测中发挥更大的作用。

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