在研究和诊断自身免疫性疾病中的应用

第二节　在研究和诊断 自身免疫 性疾病中的应用

　　在 自身免疫 性疾病的诊断中，目前常常用免疫细胞化学技术检查相应的自身抗体作为重要诊断依据之一，并以此探讨 自身免疫 性疾病发生的免疫机理。

用免疫荧光法可以检查的自身抗体日益增多，具有器官特异性的自身抗体如甲状腺球蛋白抗体和甲状腺微粒体抗体，甲状腺第二胶质抗体，肾上腺抗体，胃壁细胞抗体，皮肤表皮间粘合质（Intercellular Cement of epidermis）抗体和基底细胞层抗体，唾液腺导管细胞抗体，胰岛细胞抗体，肾小球基底膜抗体，结肠粘膜上皮多糖物质抗体，精子抗体，卵巢抗体，胃G细胞抗体等。

用免疫荧光法可以检查出的非器官特异性自身抗体，有抗核抗体，平滑肌抗体，线粒体抗体、横纹肌抗体、神经髓鞘（外周）抗体、抗网状纤维抗体等。

还有报告用免疫荧光法检查血细胞自身抗体如抗白细胞（淋巴细胞）、红细胞，血小板抗体等。

一、抗核抗体（Antinuclear antibodies, ANA）的检测

　　Friou等（1957）首先用免疫荧光法检查出存在于SLE病人血清中的NAN，Alexander和Duthie（1958）证实了Friou等的结果。Friou等（1958）检查了28例SLE病人血清中有27例ANA阳性。一例阴性属临床长期不活动 性病 人。以后大量报告都指出用免疫荧光间接法检查ANA对于临床诊断SLE有重要价值，其阳性率在80%～100%之间，阳性对于SLE病有确诊价值，但阴性不能完全排除SLE，因为少数活动性SLE其ANA可能维持阴性，Fessel氏认为可能是一种亚型。正常人0%～4%，类风湿关节　炎、皮肌炎、硬皮病、sjogeren’s综合征，混合性结缔组织病、慢性活动性肝炎等多种疾病也呈不同程度的ANA阳性率，ANA可能是一种自身免疫反应的一个重要指标。ANA在各种疾病中的百分率见表15-1。

表15-1 抗核抗体在各种疾病中的百分率

临床诊断 人次 阳性率（%） 临床诊断 人次 阳性率（%） SLE 61 98.5 Grave’s病 15 23.5 SLE（？） 14 57.1 风湿病 30 23.3 DLE 19 52.6 风湿性心肌炎 54 20.3 类风湿病 66 31.8 心肌炎 145 8.3 皮肌炎 21 60.6 病毒性心肌炎 25 24.0 重症肌无力 9 66.6 冠心病 281 3.6 甲状腺炎（桥本氏病） 24 29.1 心肌梗塞 17 35.4 亚急性甲状腺炎 15 40.0 心肌病 42 16.6 I 130 治疗后甲亢 46 32.6 糖尿病 37 24.3 甲状腺机能亢进（ 甲亢 ） 300 22.0 慢性萎缩性胃炎 96 8.3 甲状腺机能低下（甲低） 17 23 胃炎 36 0 结缔组织病 13 59.2 胃溃疡 23 0 疑为自身免疫性疾病 869 23.5 胃癌 35 11.4 急性肝炎 82 22.7 非特异性溃疡性结肠炎 11 54.5 乙型肝炎 82 65.8 十二指肠溃疡 8 37.5 慢性肝炎（HBsAg） 132 27.3 HBsAg带菌者 23 4.3 慢性活动性肝炎 9 77.7 慢性气管炎 791 20.8 慢性迁延性肝炎 44 19.1 过敏性紫斑 3 0 肝硬化 61 27.3 烧伤 12 0 胆汁性肝硬化 3 0 高脂血症 6 0 肝癌 18 27.7 Adison’s病 3 0 肝黄萎缩 27 18.5 雷诺氏病 3 2例阳性 地方性甲状腺肿 21 28.6 扁平苔藓 11 0 地方甲状腺肿手术后 25 0 正常对照 281 5.3

Hargraves对狼疮细胞（1948）已进行了大量的研究，证明引起狼疮细胞发生的因子，为抗核成分的抗体。抗核抗体是一组对细胞核内DNA，RNA或组蛋白、或这些物质的分子复合物的自身抗体，目前发现至少有十七种。这些抗核抗体对于结缔组织病的致病病因的探讨和临床诊断均有重要帮助。这些结缔组织病各有不同的抗核抗体谱（Antinuclear Antibodies profile）。

目前，国内已建立了11种测定方法，提高了结缔组织病的诊断水平。

用作检查ANA的抗原很多，如鸡的红细胞核，人白细胞，皮肤，甲状腺、脾脏、淋巴瘤、胸腺、肾、羊膜细胞、颊细胞等，还有Hela细胞，大小白鼠的肝和肾冰冻切片（4～6μm）等，以成年小白鼠的肝切片最为常用。用动物细胞核作抗原，可以避免血型的干扰因素。Konice氏等（1978）报告用马疫锥虫（Trypanosoma equiperdum, TE）作抗原测定SLE病人血清中抗双链DNa （dsDNA）因TE的核和动基体为不含蛋白的纯dsDNA，抗原性纯一，特异性强，不需提纯，为天然的dsDNA底物，据认为抗dsDNA抗体为SLE所特有，一些研究指出dsDNA抗体与SLE病情活动及狼疮肾炎的发病机理有密切关系，持续高滴度的抗dsDNA抗体是狼疮肾炎的不祥之兆。

1．抗核抗体的荧光形态及临床意义ANA的荧光形态和其相应抗原有密切关系，ANA的抗原性质和自身免疫性疾病有关，所以，观察荧光形态与临床诊断可能有一定联系。

　　（1）周边型（或称核周型）：可见荧光以核边缘强，核轮鲜明，靠核膜的荧光呈绒毛状，核中心荧光弱或无。这是天然DNA或去氧核糖蛋白的抗体产生的一种荧光形态，肝细胞核，肾小管上皮细胞核和鸡红细胞核较典型。常见于活动性系统性 红斑狼疮 病人血清中。药物引起的狼疮样综合征也常出现。这些病人病情严重，肾受累的约占56%，与疾病进行性发展和狼疮细胞现象密切相关。