基因文库的构建(一)
一个基因文库中应包含的克隆数目与该生物的基因组的大小和被克隆 DNA片段的长度有关。原核生物的基因组较小,需要的克隆数也较少;真核生物的基因组较大,克隆数需相应
一个基因文库中应包含的克隆数目与该生物的基因组的大小和被克隆 DNA片段的长度有关。原核生物的基因组较小,需要的克隆数也较少;真核生物的基因组较大,克隆数需相应增加,才能包含所有的基因。此外,每一载体DNA中所允许插入的外源DNA片段的长度较大,则所需总克隆数越少;反之则所需数越多。如果一个基因文库的总克隆数较少,则从中筛选基因虽然比较容易,但给以后的分析造成困难,因为片段的长度增加了。如果要使每一克隆中的 DNA片段缩短,就须增加克隆数,所以在建立基因文库前应根据研究目的来确定 DNA片段的长度和克隆的数目。
L.克拉克和J.卡邦在1975年提出一个统计学的公式来计算某一基因文库中所应包含的克隆数目。在建立基因文库时,任何一个DNA片段都是在随机的基础上被克隆的。