细胞特性

1） 来源：巨噬细胞

2） 形态：多角形，贴壁生长

3） 含量：>1x106 个/T25 方瓶

4） 污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

5） 规格：T25 瓶或者 1mL 冻存管包装 

 

细胞接受后的处理：

1） 收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。

2） 请先在显微镜下确认细胞生长状态，去掉封口膜并将 T25 瓶置于 37℃培养约 2-3h。

3） 弃去 T25 瓶中的培养基，换用新鲜的完全培养基。

4） 如果细胞长满（90%以上）请及时进行细胞传代。

5） 接到细胞次日，请检查细胞是否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。 细胞用途：仅供科研使用。 

                        

明舟生物的细胞培养操作规程，供参考

一．培养基及培养冻存条件准备：

1） 准备 DMEM/F12 培养基，89%；优质胎牛血清，10%；P/S，1%。

2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为 70%-80%。

3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。

二、细胞处理：

1） 复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管迅速放入 37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解 冻，移入事先准备好的含有 4mL 培养基的 15ml 离心管中混合均匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，加入 1mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有 5ml 培养基的培养瓶中 培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2） 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 对于贴壁细胞，传代可参考以下方法： 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS润洗细胞 1-2次。 2. 加 2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培养箱中消 化 5-8分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅

 

速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入 5ml此细胞的培养基终止消化。 3. 轻轻吹打后吸出，移入 15ml离心管中，在 1200RPM条件下离心 5分钟，弃去上清液，加入 10mL培养液后吹匀。 4. 每 5ml细胞悬液分装到 2个 T-25培养瓶中进行培养。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，先要消化处理并进行细 胞计数。消化方法按照细胞传代方法的 1-3步骤进行，最后的重悬液使用血清。悬浮细胞直接计 数后离心，用血清重悬浮，加 DMSO至最终浓度为 10%。加入 DMSO后迅速混匀，按每 1ml的 数量分配到冻存管中。本公司按每个冻存管细胞数目大于 1X106个细胞冻存。 

 

注意事项：  1. 收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。 2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废 液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。