浅析细菌不染色标本检查法

不染色标本一般用于观察细菌动力及运动情况，因为不染色标本直接在普通光学显微镜下，不能清楚看到细菌的形态与结构特征。细菌未染色时无色透明，在显微镜下主要靠细菌的折射率与周围环境不同进行观察。有鞭毛的细菌在镜下呈活泼有方向的运动，无鞭毛的细菌则呈不规则布朗运动。常用的方法有压滴法、悬滴法。

1、实验材料
（1）菌种变形杆菌6—12h肉汤培养物、葡萄球菌6—12h肉汤培养物。
（2）玻片普通玻片、凹玻片、盖玻片。
（3）其他吸管、酒精灯、接种环、凡士林等。

2、实验方法
（1）悬滴法
①取2张洁净凹玻片，在凹窝四周涂少许凡士林。
②用接种环各取!环变形杆菌、葡萄球菌培养物分别置于两片盖玻片中央。
③将凹玻片倒合于盖玻片上，使凹窝中央正对菌液。
④迅速翻转载玻片，用小镊子轻压，使盖玻片与凹窝边缘粘紧封闭，以防水分蒸发。
⑤先用低倍镜找到悬滴边缘，再换高倍镜，观察时应下降聚光器，缩小光圈，减少光亮，使背景较暗易于观察。

（2）压滴法
①用接种环取2—3环菌液置于洁净载玻片中央。
②用小镊子夹1块盖玻片轻轻覆盖在菌液上，放置盖玻片时应注意，先将盖玻片的一端接触菌液，缓缓放下。以免产生气泡。
③先用低倍镜观察，找到细菌所在部位后再换高倍镜观察，看细菌能否运动。

3、实验结果
变形杆菌有鞭毛，运动活泼，可向不同方向迅速运动。葡萄球菌无鞭毛，不能做真正运动，只能在一定范围内做位移不大的颤动，这是受水分子撞击而呈分子运动（布朗运动）。
检查细菌动力时需注意区分真正运动和分子运动，前者是由于细菌鞭毛引起的有方向性的位移。而后者是因水分子撞击细菌而引起的布朗运动，只在原地颤动，无鞭毛的细菌仅有此种分子运动。另外，需注意标本片制好后应尽快观察，以免水分蒸发影响观察结果。