微生物学

小鼠肝细胞（AML12）

2024-11-21 微生物学加入收藏

小鼠肝细胞（AML12）小鼠肝细胞（AML12）介绍：此AML12（α小鼠肝脏12）细胞系由来自针对人TGFα的转基因小鼠（CD1菌株，品系MT42）的肝细胞建

小鼠肝细胞（AML12）

小鼠肝细胞（AML12）介绍：此AML12（α小鼠肝脏12）细胞系由来自针对人TGFα的转基因小鼠（CD1菌株，品系MT42）的肝细胞建立。通过电子显微镜观察，这些细胞表现出典型的肝细胞特征，例如过氧化物酶体和胆小管样结构。小鼠肝细胞（AML12）保留表达血清（白蛋白，α1抗胰蛋白酶和转铁蛋白）和间隙连接（连接蛋白26和32）蛋白的高水平mRNA的能力，并且仅含有乳酸脱氢酶的同工酶5。细胞表达高水平的人TGFα和较低水平的小鼠TGFα。肝脏特异性蛋白质的表达在培养中随时间降低，但通过在无血清培养基中培养细胞而重新激活。。

小鼠肝细胞（AML12）特性：

1）来源：小鼠，肝

2）形态：上皮样细胞

3）含量：>1x106 个/mL

4）污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

5）规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

运输和保存

可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式

（1）干冰运输，收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏；

（2）存活细胞，收到后应继续生长，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

（3）收到细胞后请拍照，3天内如果发现污染，请及时拍照与我们联系。

小鼠肝细胞（AML12）用途：仅供科研使用。

小鼠肝细胞（AML12）接收后的处理：

1）收到细胞后，请检查发货培养瓶的状况，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。

2）在显微镜下确认细胞生长状态时，最好在低倍镜（4或5X物镜)下进行，能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X和20×物镜下，同时给刚收到的细胞拍照，（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为细胞需要售后时提供收到细胞时细胞状态的依据。

3）观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h。

4）贴壁细胞：在运输过程中贴壁细胞会有脱落的现象，如发现贴壁细胞有脱落或者脱落后抱团生长，可将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，然后抽出瓶中的培养基和未贴壁细胞1000rpm离心5分钟，弃去上清重悬后接种到加有按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基的原培养瓶中（或新的培养瓶中）。

5）悬浮细胞：T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟，弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中（加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基）。

6）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议1：2传代。

小鼠肝细胞（AML12）培养步骤

一．小鼠肝细胞（AML12）培养基及培养冻存条件准备：

1）准备DMEM/F12基础培养基；优质胎牛血清，10%；10ug/mL胰岛素；转铁蛋白5.5ug/mL; 5ng/mL硒; 40ng/mL地塞米松;双抗，1%。

2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入250px皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。