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蛋白质提取与制备
1蛋白质提取与制备 蛋白质提取与制备蛋白质种类很多,性质上的差异很大,既或是同类蛋白质,因选用材料不同,使用方法差别也很大,且又处于不同的体系中,因此不可能有一
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Western Blot详解-常见的问题指南(二)
4. 滤纸、胶和膜的问题X. NC膜\ PVDF膜\ 尼龙膜怎样鉴别? 解答:尼龙膜是较理想的核酸固相支持物,有多种类型;硝酸纤维素膜是目前应用最广的一种固相支
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Western Blot详解-常见的问题指南(三)
6. 染色的选择OO. Western Blot哪种染色好? 解答:(1)阴离子染料是最常用的,特别是氨基黑,脱色快,背景低检测极限可达到1.5μg,考马虽然与
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蛋白质组学同位素标记的亲和标签方法
Aebersold和其合作者开发了一种同时对蛋白质组进行鉴定和相对定量的方法,即一种包含在无胶蛋白质组流程中的同位素标记技术(Gygi等,1999)。他们提出使
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ABIGEN实验方法
DNA提取次柱漂洗确保高纯度,典型的产量200µl全血可提取出3-6µg,OD260/OD280典型的比值达1.7~1.9,长度可达30 kb -50kb,可直
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纯化全长/高纯度蛋白方法( Double-tag)
Double-tag在蛋白纯化过程中的应用 Protein表达是一个非常复杂的过程,因此很难预测表达的蛋白是
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肾组织提总蛋白的方法
EDTA和Tris的混合液,配方:Tris-Cl (pH7.4) 20mM,EDTA 1mM.可加入蛋白酶抑制剂,提取磷酸化的蛋白还需加Na3VO4 0.1mM
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AKTA快速蛋白分离系统和HPLC 的优劣比较
HPLC 优点:高压 速度快 分析精度高 所需样本量少,主要用于分析 纯化多肽类 缺点:柱子较贵 有些需要用乙氰甲醇等有毒有害试剂 不能或只能纯化 很小量的蛋白
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seldi技术介绍
SELDI-ProteinChip 表面增强激光解吸离子化-蛋白质芯片系统(surface enhanced laser desorption ionizati
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高通量蛋白质组学新时代——iTRAQ技术
VIP技术服务:iTRAQ技术起源&发展:iTRAQ (isobaric tags for relative and absolute quantitation
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Westernblot实验步骤及注意事项
Westernblot 实验步骤1. 组织块称重2. 利用液氮、研钵粉碎组织块3. 加入RIPA缓冲液(每克组织3 ml RIPA),PMSF(每克组织30 μ
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免疫印迹法
Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,
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Western Blot详解-原理
Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,
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经典的western方法
Western转膜步骤 下面的步骤适用于通过Xcell Ⅱ转印系统进行蛋白印记的大部分应用。为达到最佳效果,用户的优化是必要的。 I. 所需材料: •
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电泳和Western转印的常见问题
表1 Common problems for electrophoresis and western bloting问 题可能原因建议解决方法推荐电压条件下电泳