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【实验技巧】WB 上样前如何制样
WB 是实验室常见实验之一,蛋白定量后,上样之前,还需要哪些步骤制样呢?1. 蛋白含量测定后,Invent 建议大家把各个样品稀释到某一固定浓度(稀释可使用 P
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关于原核表达载体
yhbdxs:实验思路是这样的,将目的基因连接到含有GFP的表达载体上,得到GFP和目的基因的融合蛋白,再纯化。我现在还没有选定用哪个载体,请你们帮帮我,太多不
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蛋白质组学入门问题FAQ
常见问题——— HPLC 篇 1 . HPLC 灵敏度不够的主要原因及解决办法 样品量不足:解决办法为增加样品量 样品未从柱子中流出:可根据样品的化学性质改变流
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绿色荧光蛋白在抗肿瘤药物研究中的应用
概述 1962年Shimomure等首先从维多利亚水母(Aequorea Victoria)中分离出了GFP (Green-Fluorescent Protei
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Pichia酵母表达系统使用心得
甲醇酵母表达系统有不少优点,其中以Invitrogen公司的Pichia酵母表达系统最为人熟知,并广泛应用于外源蛋白的表达。虽然说酵母表达操作简单表达量高,但是
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【实验技巧】丽春红染色
丽春红(Ponceau S)染色是 WB 实验中的一个重要环节,今天就来给大家详解丽春红染色的作用和操作方法。丽春红染色作用可用于 PVDF 膜,硝酸纤维素膜和
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静脉用免疫球蛋白在神经系统疾病中的应用
免疫球蛋白的主要成分是IgG,约占机体免疫球蛋白总量的75%,后者不仅具有与抗原特异性结合的特征,还有固定补体、调理单核巨噬细胞吞噬能力的生物学特性,而且是唯一
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蛋白质的表达、分离和纯化
目的要求(1)了解克隆基因表达的方法和意义。(2)了解重组蛋白亲和层析分离纯化的方法。实验原理克隆基因在细胞中表达对理论研究和实验应用都具有重要的意义。通过表达
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植物基因在大肠杆菌中的原核表达
通过大肠杆菌表达目的基因大量获得重组蛋白是一个方便快捷的方法。植物中克隆的目的基因被克隆到特异设计的质粒载体上,受噬菌体T7强启动子控制;表达由宿主细胞提供的T
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原核表达:遇到瓶颈怎么办
我想表达遇到的第一个瓶颈估计就是为什么我的外源片段插到载体里面,PCR鉴定没问题,双酶切也OK,可是就是不见表达。一般我们是如何判断没有表达呢?大多都是首先进行
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人类蛋白质组表达谱蛋白质鉴定的分步搜索策略
吴松锋,朱云平,贺福初 军事医学科学院放射医学研究所,北京 100850 Key Words: 蛋白质组;蛋白质鉴定;蛋白质数据库;质谱 Abstract 大规
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His Tag的功与过
先介绍一下His Tag,为5-15 His 串在一起的小肽, 在表达纯化中用的较为普遍的一种Tag, 从本质上说它是一种亲和性Tag,但也个案证明其也能做一些
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His-Tag原核表达――Qiagen
分子诊断近年来Qiagen公司无论在分子诊断方面,还是核酸、蛋白纯化方面都有出色的表现。在分子诊断这一块,根据Kalorama Information网站自20
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原核表达条件优化
影响E.coli 中蛋白表达量的因素影响E.coli 中蛋白表达量的因素除载体启动子结构以外,还有质粒拷贝数、质粒稳定性、mRNA结构、密码子的偏爱性和宿主菌的
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原核表达--宿主菌株选择指南
原核蛋白表达在原核蛋白表达过程中,选择构建一个合适原核表达体系需要综合考虑3大因素:表达载体、宿主菌株、表达诱导条件,以获得最满意的表达效果。事实上,在平时的实