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聚丙烯酰胺凝胶电泳PAGE胶的配制
各种浓度PAGE胶的配制(DNA电泳用)50ml体系:丙烯酰胺有效分离(bp)二甲苯青溴酚蓝丙烯酰胺30%(ml)10TBE(ml)ddH2O(ml)TEMED
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固相pH梯度等电聚焦分析讨论
固相pH梯度的优缺点固相pH梯度可窄至pH0.1的范围,因此分辨率极高,可达0.001pH;pH梯度稳定,不漂移;灵活性大,可随意选择pH梯度和斜率;重复性好;
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SDS-PAGE电泳过程中常见问题以及解决方法
几乎所有蛋白质电泳分析都在聚丙烯酰胺凝胶上进行,而所有条件总要确保蛋白质解离成单个多肽亚基并进可能减少其相互间的聚集,最常用的就是SDS-PAGE电泳技术,关于
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SDS-PAGE常用参数
聚丙烯酰胺的特性,包括机械性能,弹性,透明度,孔径大小取决于T,C,T是两个单体(单体丙烯酰胺和N-N’-甲叉双丙烯酰胺)的总百分浓度,C是与总浓度有关的交联
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SDS-PAGE胶的干燥
凝胶干燥时遇到的主要问题是凝胶的变形和破裂。将凝胶放在Whatman 3MM滤纸上可防止干燥凝胶变形,但凝胶是否破裂取决于凝胶的厚度和干燥器的质量,因此,应尽
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聚丙烯酰胺凝胶电泳
实验试剂:试剂贮备液:1、 1mol/L HCl48ml,Tris36.6g,TEMED0.23ml,加蒸馏水配成100ml,pH8.9。2、 1mol/L H
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SDS-PAGE实验操作
试剂:1. 5x样品缓冲液(10ml):0.6ml 1mol/l的Tris-HCl(pH6.8),5ml 50%甘油,2ml 10%的SDS,0.5ml巯基乙醇
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蛋白质双向电泳过程与体会
双向电泳IEF (sigma) IEF(not IPG)/SDS-PAGE最简单的装备推荐如下,适合于没多少money做IPG又想做“热”的所谓蛋白质组的.IE
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SDS-PAGE胶染色
一、各种蛋白染色方法的灵敏度比较染色方法灵敏度与质谱的兼容性Silver1- 10ng-Silver (MS compatible)10ng+Comassie
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SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的分子量(垂直板型电泳)
一、目的:1.学习SDS—PAGE测定蛋白质分子量的基本原理。2.掌握垂直板型电泳的基本操作技术。二、原理:由实验十五中已知,蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中电泳时,它
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过氧化物酶同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳
一、目的1、了解聚丙烯酰胺凝胶电泳原理2、了解聚丙烯酰胺凝胶的制作过程3、了解过氧化物酶同工酶电泳过程二、实验原理:1、电泳原理及影响电泳的主要因素带电粒子在电
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SDS-聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分离蛋白质
一、目的要求1.学习电泳原理和技术2.学习和掌握SDS-聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分离蛋白质技术二、原理聚丙烯酰胺凝胶是由单体丙烯酰胺(acrylamide,简称
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等电聚焦电泳法测定蛋白质的等电点
一、实验目的了解等电聚焦的原理。通过蛋白质等电点的测定,掌握聚丙烯酰胺凝胶垂直管式等电聚焦电泳技术。二、实验原理等电聚焦(Isoelectric focusin
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SDS-PAGE测定蛋白质分子量及蛋白质的纯度鉴定
一、实验目的与原理蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中电泳时,它的迁移取决于它所带电荷以及分子大小和形状等因素。1967年Shapiro等人发现,如果在聚丙烯酰胺系统中加入
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表达蛋白的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析
一、原理细菌体中含有大量蛋白质,具有不同的电荷和分子量。强阴离子去污剂SDS与某一还原剂并用,通过加热使蛋白质解离,大量的SDS结合蛋白质,使其带相同密度的负电