蛋白质技术

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蛋白质技术

Western Blot为什么必须要用内参？

要检测一个基因的表达产物是否正确，或者比较表达产物量的相对变化，首选方法是Western Blot。因为Western Blot操作相对简单方便，既可以定性分析
Western Blot实验准备与步骤

一、材料和方法1．试剂及耗材蛋白抽提试剂（改进型RIPA配方）BCA蛋白定量试剂盒5还原样品缓冲液10Tris-Glycine-SDS电泳缓冲液考马斯亮蓝染色液
Western blot 实验过程与经验分享

一、蛋白样品的制备与定量（提取好的蛋白是成功的一半）（1）提细胞蛋白① 消化或刮下细胞至 1.5 的 EP 管中，标记，10000r 离心 2 min，PBS
变性梯度凝胶电泳(DGGE)

一、实验原理变性梯度凝胶电泳（DGGE）是一种根据DNA片段的熔解性质而使之分离的凝胶系统。核酸的双螺旋结构在一定条件下可以解链，称之为变性。核酸50%发生变性
重组细胞因子分类及应用概述

一、细胞因子的概念细胞因子(cytokine)是由机体多种细胞分泌的小分子蛋白质，通过结合细胞表面的相应受体发挥以调节免疫应答为主的生物学作用。细胞因子具有非
血浆蛋白质的测定概述

一、血浆蛋白质的组成及功能血浆蛋白质是血浆固体成份中含量最多、组成复杂、功能广泛的一类化合物。占血浆固体成份90%左右，目前已经研究的血浆蛋白质有300多种，
血清总蛋白的测定（双缩脲法）

一、原理蛋白质分子中的肽键在碱性条件下能与二价铜离子作用生成紫红色的络合物，产生的颜色强度在一定范围内与蛋白质的含量成正比，但双缩脲反应并非蛋白质特有的颜色反应
灌胶注意事项及问题解答

一、注意事项1. 清洗厚薄两块玻片：初次使用需要用酒精棉球擦拭干净。经常使用用自来水冲洗干净后，再用单蒸水冲洗，晾干。也可用酒精擦拭。2. 取合适大小，容器将各
Western blot实验步骤及注意事项

一.实验步骤1. 组织块称重2. 利用液氮、研钵粉碎组织块3. 加入RIPA缓冲液（每克组织3 ml RIPA），PMSF（每克组织30μl，10 mg/ml
制取蛋白质选择材料及预处理

以蛋白质和结构与功能为基础，从分子水平上认识生命现象，已经成为现代生物学发展的主要方向，研究蛋白质，首先要得到高度纯化并具有生物活性的目的物质。蛋白质的制备工作
Western Blot基本概念

印迹技术1975，Edwen Southern提出分子印迹概念。概念：将存在于凝胶中的生物大分子转移（印迹）于固定化介质上并加以检测分析的技术。目前主要应用于D
WB 或 IP 样品制备的技术指导

在 WB 和 IP 实验中，破碎细胞或组织与选择和配制裂解液一样重要。比起一些更软的组织（如脑组织），在准备 WB 或 IP 的样品时，紧密的纤维组织（如肌肉组
Western Blot转膜

在电流的作用下，使蛋白质从胶转移至固相载体（膜）上。膜的选择：印迹中常用的固相材料有NC膜、DBM、DDT、尼龙膜、PVDF等。我们选用PVDF（聚偏二氟乙烯）
如何监控转膜的效率呢？

在早期，鄙人亦依据分子克隆的介绍，采用立春红染膜。只是后来发现此操作不仅增加额外的操作时间，而且不能说明任何问题，于是抛弃之。首先，立春红（也包括考染胶）的灵敏
利用快速蛋白质层析系统（FPLC）分析啤酒中含氮化合物的组成

摘要：用蛋白质快速层析系统（FPLC）的几种层析技术对啤酒中的含氮化合物组成进行了研究。利用Suprose6/Superose12体积排阻柱对啤酒经透析得到的蛋