直接PCR法检测血液中伊氏锥虫感染

锥虫的感染，本文以伊氏锥虫kDNA片段为靶扩增DNA设计引物，确定最适PCR反应条件，建立kDNA片 段的PER扩增技术，应用直接扩增缓冲液(Ampdirect)从感染小鼠的 滤纸 血标本直接PER检测伊氏锥虫。 结果发现，PER扩增伊氏锥虫kDNA片段分子量为364 bp。能检测的最小DNA量是O．06 Pg，与布氏锥虫、 活动锥虫没有交叉反应。应用直接扩增缓冲液不需进行样本的DNA抽提，直接PER能检测感染小鼠的早期 滤纸 血样本，敏感性高于镜检法。本实验建立的直接PCR法检测伊氏锥虫具有较高的敏感性和特异性，方 法快捷，可进一步应用于伊氏锥虫病的早期诊断以及现场调查。 关键词伊氏锥虫；直接PCR；动基体DNA(kDNA)；血液