羊水栓塞动物模型

羊水栓塞是指分娩过程中羊水突然进入母体血液循环引|起急性肺栓塞、过敏性休克、弥散性血管内凝血、肾衰竭或猝死的严重分娩并发症，至今机制未明。目前的动物模型制作主要采用来源于自体、异体或人的原羊水或粪染羊水或羊水与胎盘提取液的混合液注射入动物血液循环中而获得。常用的动物有山羊、兔、大鼠、犬、迷你猪、猫等，而猕猴被证明不适合做羊水栓塞的动物模型（animal models of amniotic fluid embolism）。

原理

羊水栓塞动物模型的基本原理是污染羊水中的有形物质（胎儿毳毛、角化上皮、胎脂、胎粪）可造成机械栓塞，激活、消耗大量的补体，活化裂解片段，细胞进一步被活化产生和释放许多毒性氧自由基、花生四烯酸及细胞因子，直接或间接地导致机体自身组织的损伤。

用途

制作动物模型时，可根据需要在动物麻醉后进行动静脉插管。可将 7-F 或 5-F 的 Swan-Ganz 肺动脉漂浮导管置干颈静脉、肺动脉，用来监测中心静脉压、肺动脉压、肺毛细血管楔压，5-F 的聚氯乙烯导管分别在股动脉和股静脉放置，肺动脉和股动静脉导管通过换能器与 PcLab 多道生理记录仪连接，持续监测血流动力学变化，股静脉用于羊水的注入及收集血标本等。大鼠可分离右颈外静脉和左颈总动脉，左颈总动脉插管可接三通管连接二道生理记录仪用于连续监测平均动脉压（MAP）；右颈外静脉接通 = 通管，制备好的注射液可由此注入。

材料与仪器

实验材料：羊水样本。

步骤

羊水栓塞动物模型的基本过程可分为如下几步：

A. 羊水样本的收集与配制

（1）原羊水收集

1）人羊水收集: 可在足月妊娠的孕妇剖宫产术中抽取。

2）大鼠羊水收集: 取孕龄 19～21 天的大鼠，术前禁食 12 小时，饮水不受限制。将孕鼠麻醉后固定于手术台上、消毒，沿下腹正中切口打开腹腔，暴露子宫，用胜理盐水清洗子宫后行子宫次全切除术，关腹。用注射器抽取羊膜腔内的羊水置 37 ℃ 水浴箱保存。

3）羊羊水收集: 妊娠 120～150 天的山羊，术前禁食 12 小时，饮水不受限。动物静脉麻醉后固定于手术台上。听诊证实肺野清晰，此后的麻醉水平维持在使动物有自主呼吸，但无自主运动及咳嗽。沿腹部正中切口打开腹腔，暴露子宫，用温生理水清洗后切开子宫，暴露羊膜，用注射器吸出羊水，娩出胎羊和胎盘，关闭子宫及腹壁。未行剖宫产的动物可采用直接穿刺抽取羊水。

（2）过滤羊水的制备: 原羊水用 5 μm 的过滤器过滤获取。

（3）粪染羊水制备: 小动物如鼠、兔等切开胎仔腹壁，取下大肠，轻轻挤压出胎粪，或用原羊水冲洗肠腔，获得混有胎粪的羊水液，或按需要比例将胎粪混合到羊水中，一般配成含 1%～4% 胎粪的羊水。

（4）含胎盘提取液的羊水制备: 取胎盘组织匀浆，以 3000 r/min 的转速离心 10 分钟，取上清液，与自体羊水原液以 1:40 混匀。

B. 羊水注射制备后羊水一般在 1 小时内使用。根据需要将原羊水或过滤羊水或制备好的羊水混合液以 2.5 ml/kg 的剂量快速注入动物颈静脉或股静脉。兔一般通过耳缘静脉注入。

注意事项

相对于原羊水或羊水滤过液，粪染羊水或含胎盘提取液的羊水注入后，可|起更明显或更严重的病理生理改变。