实验方法

常用抗生素溶液有哪些？

贮存液a工作浓度抗生素浓度保存条件严紧型质粒松弛型质粒氨苄青霉素50mg/ml(溶于水)-20℃20μg/ml60μg/ml羧苄青霉素50mg/ml(溶于水)-

western-blot实验常见问题及解决方案（enlight）

导致western Blot发光（ECL）“背景高”的原因有哪些？

Western Blot发光经常有“背景太高”问题，导致“背景高”的原因有很多，主要有以下几个方面：1. 抗体浓度过高，洗涤不充分，可以造成抗体在膜上的非特异结

蛋白质的长期保存——以冻干固体的形式保存

一种按适当配方制造的冻干蛋白质制剂能够在几年内保持稳定，即使是在室温(Carpenter and Chang 1996) ；然而，冻干配方的最佳溶液组成和工艺条

离心的种类和原理

离心方法主要有两种：制备型（用来分离某些颗粒）和分析型（用来了解分离颗粒的物理性质）。分子或细胞生物学实验室中所作的决大多数离心机属于制备型离心机，而多数常规制

如何提高qPCR反应的灵敏度与特异性？

1. 首先确定模板RNA完整性好，无DNA污染。2. RNA模板中不应含有扩增反应抑制剂。3. 为了防止模板降解，在反应体系中加入RNase抑制剂RNasin。

磷酸钙转染法实验原理及步骤

【实 验 原 理】磷酸钙沉淀法是基于磷酸钙-DNA复合物的一种将DNA导入真核细胞的转染方法。磷酸钙有利于促进外源DNA与靶细胞表面的结合。磷酸钙-DNA复合物

琼脂糖凝胶电泳拖尾了怎么办？

跑过琼脂糖凝胶电泳的小伙伴，是不是经常遇到过电泳拖尾的现象啊？相信不少人点头如捣蒜了。提个质粒拖尾，提个DNA拖尾，连PCR也拖尾，拖尾什么的最常见了。验证也就

寡聚（dT）-纤维素柱层析法分离纯化mRNA

【试剂与器材】（一）试剂1． 0.1mol/L NaOH ，每组200mL2． 寡聚Oligo（dT）-纤维素3． 加样/洗涤缓冲液1：0.5 mol/L Na

SDS 碱裂解法制备质粒DNA: 少量制备

该实验方案是从少量( l ~ 2mL ) 细菌培养物中分离质粒DNA 。DNA 产量为l00ng~ 5μg ， 这取决于质粒的拷贝数。少量的DNA 作为体外酶促

色谱法分离蛋白质

色谱与DNA 和RNA 一样，蛋白质可以进行常规的分离，或者用色谱法来分离。主要用的色谱法是凝胶过滤、离子交换层析和亲和层析。1. 凝胶过滤，基于分子的大小对

蛋白质印迹实验过程注意事项

· 滤纸、胶、膜之间的大小，一般是滤纸>=膜>=胶。· 滤纸、胶、膜之间千万不能有气泡，气泡会造成短路。· 因为DEPF膜的疏水性，膜必须首先在甲醇

为什么荧光原位杂交备受关注？

荧光原位杂交（Fluorescence in situ hybridization FISH）是一门新兴的分子细胞遗传学技术，是20世纪80年代末期在原有的放射

电穿孔和电融合技术原理及流程

[实验原理]当细胞置于非常高的电场中，细胞膜就变得具有通透性，能让外界的分子扩散进细胞内，这一现象称为电穿孔。运用这一技术，许多物质，包括DNA、RNA、蛋白质

在果蝇S2细胞中通过反义寡核苷酸抑制miRNA 功能

本方案描述了将ASO 转入果蝇S2 细胞以便抑制miRNA 功能的方法。通过检测miRNA靶蛋白水平或miRNA 靶基因3UTR 报道基因的活性，可以检测ASO