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DNA实验

报道基因活性的同位素分析实验(人生长激素的放射免疫分析法)

2024-06-08 DNA实验 加入收藏
材料与仪器hGH表达质粒洗涤液 亲和素包被珠试管 γ计数仪步骤1. 取转染了hGH表达质粒的哺乳动物细胞的培养液100~500 μl。2. 加100 μl


材料与仪器

hGH表达质粒
洗涤液 亲和素包被珠
试管 γ计数仪

步骤

1.  取转染了hGH表达质粒的哺乳动物细胞的培养液100~500 μl。

2.  加100 μl 培养液或标准品至12 mm×75 mm 圆底试管中。加入100 μl 125I-标记的抗体溶液,混合。加入1颗亲和素包被珠,盖上试管盖或用Parafilm膜封口,室温下在一水平旋转器上以约170 r/min 摇动下温育90 min。

3.  加2 ml 冼涤液洗磁珠两次。完全吸干洗涤液。
 
图一、人生长激素表达载体
图一、人生长激素表达载体
 
4.  将试管置于γ计数仪上计数1 min。
 
5.  用试剂盒中的hGH标准品测得的数据绘制标准曲线。用这个标准曲线来计算未知样品的hGH含量。


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