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DNA实验

附录四 实验室常用技术参数资料

2024-09-27 DNA实验 加入收藏
附录四 实验室常用技术参数资料一、核酸及蛋白质常用数据1.核苷三磷酸的物理常数化合物分子量λmax(pH7.0)1摩尔溶液(pH7.0)中λmax时的最大吸收值

附录四 实验室常用技术参数资料

一、核酸及蛋白质常用数据

1.核苷三磷酸的物理常数

化合物

分子量

λmax(pH7.0)

1摩尔溶液(pH7.0)中λmax时的最大吸收值

OD 280 /OD 260

ATP

507

259

15400

0.15

CTP

483

271

9000

0.97

GTP

523

253

13700

0.66

UTP

484

262

10000

0.38

dATP

494

259

15200

0.15

dCTP

467

271

9300

0.98

dGTP

507

253

13700

0.66

dTTP

482

267

9600

0.71

2.常用核酸的长度与分子量

核酸

核苷酸数

分子量

λDNA

48502(双链环状)

3.0×10 7

pBR322 4363(双链)

2.8×10 6

28SrRNA 4800

1.6×10 6

23SrRNA 3700

1.2×10 6

18SrRNA 1900

6.1×10 5

19SrRNA 1700

5.5×10 5

5SrRNA 120

3.6×10 4

tRNA(大肠杆菌) 75

2.5×10 4

3.常用核酸蛋白换算数据

(1)重量换算

  1μg=10 -6 g      1pg=10 -12 g

  1ng=10 -9 g      1fg=10 -15 g

(2)分光光度换算:

  1A 260 双链DNA=50μg/ml

  1A 260 单链DNA=30μg/ml

  1A 260 单链RNA=40μg/ml

(3)DNA摩尔换算:

1μg 100bp DNA=1.52pmol=3.03pmol末端

1μg pBR322 DNA=0.36pmol

1pmol 1000bp DNA=0.66μg

1pmol pBR322=2.8μg

  1kb双链DNA(钠盐)=6.6×10 5 道尔顿

  1kb单链DNA(钠盐)=3.3×10 5 道尔顿

  1kb单链RNA(钠盐)=3.4×10 5 道尔顿

(4)蛋白摩尔换算:

100pmol分子量100,000蛋白质=10μg

100pmol分子量50,000蛋白质=5μg

100pmol分子量10,000蛋白质=1μg

氨基酸的平均分子量=126.7道尔顿

(5)蛋白质/DNA换算:

  1kb DNA=333 个氨基酸编码容量=3.7×10 4 MW蛋白质

10,000MW蛋白质=270bp DNA

30,000MW蛋白质=810bp DNA

50,000MW蛋白质=1.35kb

100,000MW蛋白质=2.7kb DNA

4.常用蛋白质分子量标准参照物

(1)高分子量标准参照 (2)中分子量标准参照 (3)低分子量标准参照 肌球蛋白 分子量 磷酸化酶B 97,400 碳酸酐酶 31,00 肌球蛋白 212,000 牛血清白蛋白 66,200 大豆�蛋白酶 21,500 β-半乳糖甘酶B 116,000 谷氨酶脱氢酶 55,000 抑制剂   磷酸化酶B 97,400 卵白蛋白 42,700 马心肌球蛋白 16,900 牛血清白蛋白 66,200 醛缩酶 40,000 溶菌酶 14,400 过氧化氢酶` 57,000 碳酸酐酶 31,000 肌球蛋白(F1) 8,100 醛缩酶 40,000 大豆�蛋白酶 21,500 肌球蛋白(F2) 6,


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