山茶属植物叶片DNA抽提

摘　要　对植物中DNA抽提是在分子水平上对植物进行系统分析与研究的基础性工作.经多次实验，使用改良的CTAB法抽提山茶属植物中总DNA，即在抽提前加入抗氧化剂β-巯基乙醇，并使用冷冻的异丙醇来沉淀DNA， 获得了较好的效果，其纯度和得率完全能满足常规分子生物学操作的要求.

关键词　山茶属植物；DNA抽提；叶片；改良CTAB法

中图法分类号　Q523；Q949.758.4

DNA Extraction From the Leaves of Camellia Plants

Tan Xiaofeng Qi LonglinHuang XiaoguangGui Jun

(National Forestry Bureau Key Laboratory of Non-timber Product Frostry Breeding and Cultivation,

Central South Forestry University, Zhuzhou, Hunan,412006)

ABSTRACT　DNA extraction of plant is a basic work to systematically analyse and study plant at molecular level. An improved

CTAB method was found to extract DNA from leaves of Camellia plants.It is adding β-mercaptoethanol anti-oxidant before DNA extraction and using isopentenol to precipitate DNA. The purity of DNA extracted is between

1.4 and 1.8,which is suitable for RAPD experiment.

KEY WORDS　Camellia plant,DNA extraction，leaf blade，improved CTAB method

生物基因组DNA主要包括线粒体DNA（mt DNA）、核DNA（n DNA）和叶绿体DNA（cpDNA）.从生物组织中抽提DNA是对生物体进行遗传和分子生物学分析与操作的最基本的步骤和环节.动物与微生物的细胞无细胞壁，组成相对较为简单，其DNA抽提也较简单；

植物组织DNA的抽提步骤则要繁杂得多，而且由于不同植物间的化学成分差异，其中主要是酚类等对DNA抽提的影响很大，因而具体到不同的植物，其抽提方法又略有不同.山茶属植物种类很多，其中不同的类群之间组成成分差异也较大.本研究的目的是探索山茶属植物通用的DNA抽提方法，为进一步开展山茶属植物在DNA水平上的系统分析、研究奠定基础.

1　材料和方法

1.1　实验材料

实验的金花茶组植物叶片采自广西南宁金花茶公园，置于-76℃超低温冰箱中保存备用.其它山茶属植物叶片材料采自中南林学院山茶属植物基因库.用于DNA抽提实验的山茶属植物共32种（见表1）.这些种类代表了山茶属植物2个亚属当中的大部分组.

表1　山茶属植物DNA抽提实验材料

Table 1　Experimental materials from Camellia plants