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微生物学

罗猴胎肾细胞(MA-104)

2024-11-22 微生物学 加入收藏
罗猴胎肾细胞(MA-104)罗猴胎肾细胞(MA-104)介绍:罗猴胎肾细胞(MA-104)衍生于罗猴胎肾。细胞对猴轮状病毒(Simian rotavirus S

罗猴胎肾细胞(MA-104)

罗猴胎肾细胞(MA-104)介绍:罗猴胎肾细胞(MA-104)衍生于罗猴胎肾。细胞对猴轮状病毒(Simian rotavirus SA11) 高度敏感。可用于很多病毒的增殖。

罗猴胎肾细胞(MA-104)特性:

1) 来源:罗猴胚胎肾

2) 形态:上皮细胞样

3) 含量:>1x106 /mL

4) 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

5) 规格:T25 瓶或者1mL 冻存管包装

运输和保存:

可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式:

1)干冰运输,收到后立即转入液氮冻存或直接复苏;

2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见培养步骤。

罗猴胎肾细胞(MA-104)用途:仅供科研使用。

罗猴胎肾细胞(MA-104)培养步骤:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO1.5g/L,D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠0.11g/L)85%;优质胎牛血清,15%

2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37 摄氏度,培养箱湿度为70%-80%

3)冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。

二.细胞处理:

1) 复苏:将含有1mL 悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4mL 培养基混合均匀。在1000RPM 条件下离心分钟,弃去上清液,补1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm 皿中,加入约8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代:如果密度达80%-90%,即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS 润洗细胞1-2 次。

2. 2ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2 分钟,然后在显微镜下观察消化情况,若大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

3. 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM 条件下离心钟,弃去上清液,补加1-2mL 培养液后吹匀。

4. 悬液按11的比例分到新的含8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml 含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO 后进行冻存

注意事项:

1. 收到后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。

2. 所有动物均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此的器皿需要灭菌后方能丢弃。


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