淀粉水解试验
一、简介微生物对大分子的淀粉、蛋白质和脂肪不能直接利用,必须靠产生的胞外酶将大分子物质分解才能被微生物吸收利用。胞外酶主要为水解酶, 通过加水裂解大的物质为较小
一、简介
微生物对大分子的淀粉、蛋白质和脂肪不能直接利用,必须靠产生的胞外酶将大分子物质分解才能被微生物吸收利用。胞外酶主要为水解酶, 通过加水裂解大的物质为较小的化合物,使其能被运输至细胞内。 如淀粉酶水解淀粉为小分子的糊精、双糖和单糖;脂肪酶水解脂肪为甘油和脂肪酸; 蛋白酶水解蛋白质为氮基酸等。
二、操作方法
淀粉水解试验
三、原理
淀粉酶水解淀粉为小分子的糊精、双糖和单糖的过程可通过观察细菌菌落周围的物质变化来证实:淀粉遇碘液会产生蓝色,但细菌水解淀粉的区域,用碘测定不再产生蓝色,表明细菌产生淀粉酶酶。
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四、材料与仪器
枯草芽孢杆菌 大肠杆菌 金黄色葡萄球菌 铜绿假单胞菌(Pseudomonas Aeruginosa)
固体淀粉培养基 革兰氏染色用卢戈氏碘液(Lugol's iodine solution)
无菌平皿 接种环和接种针
五、步骤
1. 将固体淀粉培养基溶化后冷至 50℃ 左右,无菌操作制成平板。
2. 用记号笔在平板底部划成四部分。
3. 将枯草芽孢杆菌,大肠杆菌,金黄色葡萄球菌,铜绿假单胞菌分别在不同的部分划线接种,在平板的反面分别在四部分写上菌名。
4. 将平板倒置在 37℃ 温室中培养 24 小时。
5. 观察各种细菌的生长情况,将平板打开盖子,滴入少量 Lugol's 碘液于平皿中,轻轻旋转平板,使碘液均匀铺满整个平板。
如菌苔周围出现无色透明圈,说明淀粉已被水解,为阳性,透明圈的大小可初步判断该菌水解淀粉能力的强弱,即产生胞外淀粉酶活力的高低。
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六、注意事项
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七、常见问题
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