凝胶吸附法
一、简介病毒颗粒表面特有的离子对离子交换树脂和与之类似的吸附剂有亲和性,病毒吸附之后,在适当的离子条件下可使病毒颗粒脱吸,利用这一原理可以提纯病毒。常用的吸附剂
一、简介
病毒颗粒表面特有的离子对离子交换树脂和与之类似的吸附剂有亲和性,病毒吸附之后,在适当的离子条件下可使病毒颗粒脱吸,利用这一原理可以提纯病毒。常用的吸附剂有磷酸钙凝胶、氢氧化锌凝胶、红细胞、葡聚糖、活性炭等。吸附法的专一性不强,对吸附剂的亲和性因病毒不同而异。
二、操作方法
凝胶吸附法
三、原理
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四、材料与仪器
待纯化的病毒
凝胶材料
烧杯
凝胶材料
烧杯
五、步骤
磷酸钙凝胶:这是病毒凝胶吸附法中较为常用的凝胶,由 0. 5 mol/L CaCl2 和 0. 5mol/L Na2HPO4 溶液混合制备凝胶状沉淀物,用 0. 001mol/L 磷酸盐缓冲液悬浮,置千 4℃ 4~5小时使之充分沉淀后应用。
氢氧化锌凝胶:用 7 mol/L 氨水和 0. 1 mol/L 醋酸锌溶液滴加混合 (pH8. 5) 制备氢氧化锌凝胶。把氢氧化锌凝胶混在病毒悬液中,形成的复合物沉淀后,用 0. 08 mol/L EDTA(pH8. 5)处理能比较好地解离病毒。
六、注意事项
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七、常见问题
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