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微生物学

Anthony 氏法

2024-04-23 微生物学 加入收藏
一、简介本实验介绍 3 种荚膜染色法:湿墨水法、干墨水法和Anthony 氏法。其中湿墨水法较简便、并适用于各种有荚膜的细菌。 二、操作方法 Anthon

一、简介

本实验介绍 3 种荚膜染色法:湿墨水法、干墨水法和Anthony 氏法。其中湿墨水法较简便、并适用于各种有荚膜的细菌。






  二、操作方法

   Anthony 氏法


三、原理

荚膜是包围在细菌细胞外的一层粘液状或胶质状物质,其成分为多糖、糖蛋白或多肽。由于荚膜与染料的亲和力弱不易着色;而且可溶于水,易在用水冲洗时被除去。所以通常用衬托染色法染色,使菌体和背景着色,而荚膜不着色合在菌体周围形成一透明圈。由于荚膜含水量高。制片时通常不用热固定,以免变形影响观察。

  四、材料与仪器

褐球固氮菌/胶质芽孢杆菌(约 2d 无氮培养基琼脂斜面培养物)
绘图墨水 1% 甲基紫水溶液 1% 结晶紫水溶液 6% 葡萄糖水溶液 20% 硫酸铜水溶液 甲醇
载玻片 盖玻片 滤纸 显微镜

  五、步骤

1. 涂片

按常规取菌涂片。


2. 固定

空气中自然干燥令不可加热干燥固定。


3. 染色

用 1% 的结晶紫水溶液染色 2 min。


4. 脱色

以 20% 的硫酸铜水溶液冲洗,用吸水纸吸干残液。


5. 镜检

干后用油镜观察。


菌体染成深紫色,菌体周围的荚膜呈淡紫色。


  六、注意事项

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  七、常见问题

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