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微生物学

肠道杆菌培养物和染色标本观察

2024-04-23 微生物学 加入收藏
材料与仪器步骤1、革兰氏染色标本:大肠杆菌和伤寒杆菌革兰氏染色呈红色、G-杆菌,两端钝圆,中等大小。2、琼脂平板培养物(1)伊红美蓝培养基:为常用的肠道致病菌分

材料与仪器

步骤

1、革兰氏染色标本:大肠杆菌和伤寒杆菌革兰氏染色呈红色、G-杆菌,两端钝圆,中等大小。

2、琼脂平板培养物

(1)伊红美蓝培养基:为常用的肠道致病菌分离鉴别培养基。在该培养基上,大肠杆菌能发酵乳糖产酸,使伊红与美蓝合成紫黑色化合物,故其菌落呈紫黑色,伤寒杆菌对乳糖不分解,故其菌落呈无色或微黄色透明菌落。

(2)S-S培养基:为常用的肠道致病菌选择培养基,内含柠檬酸钠、煌绿对大肠杆菌有抑制作用,胆盐对沙门菌、痢疾杆菌有促生长作用,还含有乳糖和酸碱指示剂中性红。在该培养基上,大肠杆菌能分解乳糖产酸,使菌落呈红色,伤寒杆菌不能分解乳糖,菌落无色透明。

(3)双糖铁斜面:是一种高层斜面培养基,由两层组成。上层是用蛋白胨水加入1%乳糖和硫酸亚铁制成的固体斜面,以酚红为指示剂,可观察细菌对乳糖 发酵结果和硫化氢试验结果。下层为含葡萄糖的蛋白胨水半固体,以酚红为指示剂,可观察细菌的动力和乳糖发酵能力。接种时,先用接种针按半固体培养基接种法 穿刺接种,沿原线退出后再划线接种斜面。置37℃恒温箱经18~24小时培养后观察细菌生长情况(表1)。

表1 大肠杆菌和伤寒杆菌在双糖铁斜面上的生长情况

<font>菌种</font>

<font>乳糖</font>

<font>硫化氢</font>

<font>葡萄糖</font>

<font>动力</font>

<font>大肠杆菌</font>

<font>产酸产气</font>

<font>-</font>

<font>产酸产气</font>

<font>+</font>

<font>伤寒杆菌</font>

<font>-</font>

<font>+/-</font>

<font>产酸产气</font>

<font>+</font>


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