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微生物学

支原体固体培养基接种法

2024-05-08 微生物学 加入收藏
一、简介支原体(mycoplasma):又称霉形体,为目前发现的最小的最简单的原核生物。支原体细胞中唯一可见的细胞器是核糖体(支原体是原核细胞,原核细胞的细胞器

一、简介

支原体(mycoplasma):又称霉形体,为目前发现的最小的最简单的原核生物。支原体细胞中唯一可见的细胞器是核糖体(支原体是原核细胞,原核细胞的细胞器只有核糖体)。

 二、操作方法

支原体固体培养基接种法


 三、材料与仪器

肺炎支原体
糖酵解培养基 基础培养基 牛血清 酵母浸液 酚红 醋酸铊 青霉素
培养皿 烧杯 玻璃棒 天平 移液管 离心机 棉花拭子

步骤

一、标本采集
支原体常侵及人和动物的粘膜表面,一般可用棉花拭子涂抹取样后放入2~3 ml支原体液体培养基的小管中,或取其分泌液,若标本是组织块,可在灭菌乳钵或玻璃匀浆后接种,取样后应尽快接种培养。
二、分离培养
转动拭子将标本液体尽量挤出,用无菌滴管吸1~2滴接种在平皿上盖好,用L棒涂抹或倾斜转动平皿使标本均匀分布,置37℃孵育。
三、结果观察
绝大多数支原体为兼性厌氧,少数在含10% CO2和相对湿度80~90%的大气环境中生长良好。支原体生长缓慢,多数于3~4 d长出菌落,少数于1~2 w方长出典型菌落,在平皿固体培养基上生长的菌落呈"油煎蛋"状,边缘不整齐。

常见问题

一、附录
糖酵解培养基(肺炎支原体培养基)
基础培养基 70 ml
马(或牛血清) 20 ml
25%酵母浸液 10 ml
0.4%酚红 0.5 ml
1%醋酸铊 2.5 ml
青霉素10000 IU/ml 5.0 ml
调pH 7.8


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