支原体固体培养基接种法
一、简介支原体(mycoplasma):又称霉形体,为目前发现的最小的最简单的原核生物。支原体细胞中唯一可见的细胞器是核糖体(支原体是原核细胞,原核细胞的细胞器
一、简介
支原体(mycoplasma):又称霉形体,为目前发现的最小的最简单的原核生物。支原体细胞中唯一可见的细胞器是核糖体(支原体是原核细胞,原核细胞的细胞器只有核糖体)。
二、操作方法
支原体固体培养基接种法
三、材料与仪器
肺炎支原体
糖酵解培养基 基础培养基 牛血清 酵母浸液 酚红 醋酸铊 青霉素
培养皿 烧杯 玻璃棒 天平 移液管 离心机 棉花拭子
糖酵解培养基 基础培养基 牛血清 酵母浸液 酚红 醋酸铊 青霉素
培养皿 烧杯 玻璃棒 天平 移液管 离心机 棉花拭子
步骤
一、标本采集
支原体常侵及人和动物的粘膜表面,一般可用棉花拭子涂抹取样后放入2~3 ml支原体液体培养基的小管中,或取其分泌液,若标本是组织块,可在灭菌乳钵或玻璃匀浆后接种,取样后应尽快接种培养。
二、分离培养
转动拭子将标本液体尽量挤出,用无菌滴管吸1~2滴接种在平皿上盖好,用L棒涂抹或倾斜转动平皿使标本均匀分布,置37℃孵育。
三、结果观察
绝大多数支原体为兼性厌氧,少数在含10% CO2和相对湿度80~90%的大气环境中生长良好。支原体生长缓慢,多数于3~4 d长出菌落,少数于1~2 w方长出典型菌落,在平皿固体培养基上生长的菌落呈"油煎蛋"状,边缘不整齐。
常见问题
一、附录
糖酵解培养基(肺炎支原体培养基)
基础培养基 70 ml
马(或牛血清) 20 ml
25%酵母浸液 10 ml
0.4%酚红 0.5 ml
1%醋酸铊 2.5 ml
青霉素10000 IU/ml 5.0 ml
调pH 7.8