高频法
一、简介制备好感受态细胞后，接下来就是质粒DNA转化入大肠杆菌细胞的过程。但要注意的是感受态细胞最好是新制备的，因为保存一定时间的感受态细胞会使转化率降低；此外
一、简介
制备好感受态细胞后，接下来就是质粒DNA转化入大肠杆菌细胞的过程。但要注意的是感受态细胞最好是新制备的，因为保存一定时间的感受态细胞会使转化率降低；此外DNA的浓度也要注意，不能太高。
二、操作方法
高频法
三、材料与仪器
感受态细胞
质粒DNA 抗生素
Ep管 水浴锅 LB平板
质粒DNA 抗生素
Ep管 水浴锅 LB平板
步骤
1、取新制备的一管感受态细胞。
2、取0．03 ml感受态细胞转和4 ng质粒DNA混匀，置冰浴30min
3、将 Ep管置于42 ℃水浴中热冲击2分钟，立即置于冰上1分钟。
4、在 Ep管中加70 ul LB培养基混匀，37 ℃培养30min
5、涂在含适当浓度抗生素的LB平板上。
6、37 ℃培养过夜，长出的菌斑既为阳性克隆。
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