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PCR污染原因与检测方法
PCR反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性,但令人头痛的问题是易污染,极其微量的污染即可造成假阳性的产生。污染原因一、标本间交叉污染:标本污染主要有收
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PCR技术在突变基因检测中的应用
基因突变(gene mutation)是遗传病和肿瘤发生的根本原因,检测与遗传病及恶 性肿瘤发生有关的突变基因(mutant gene)是分子生物学,医学遗传学
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PCR实验操作
PCR是极为重要的DNA增殖技术,应用层面非常广,其中包括了核酸探针的制备。如果一段DNA已经被次选殖至载体上,要以PCR扩增这段DNA时,可根据质体multi
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反向PCR(reverse PCR)相关知识
相关专题反向PCR(reverse PCR)反向PCR(reverse PCR)是用反向的互补引物来扩增两引物以外的未知序列的片段,而常规PCR扩增的是已知序列
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PCR-引物设计原则
PCR-引物设计原则1.引物最好在模板cDNA的保守区内设计。DNA序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的。在NCBI上搜索不同物种的同一基因,通过序列分
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PCR实验技术总结
PCR技术简史一、PCR的最早设想核酸研究已有100多年的历史,本世纪60年代末、70年代初人们致力于研究基因的体外分离技术,Korana于1971年最早提出核
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差异显示技术(DD-PCR)及其应用
高等植物在其生命活动过程中,由于基因的选择性表达,决定了高等植物生命活动的多样性和连续性。在植物的生长、发育、衰老和死亡过程中,都有不同的基因起作用。因此,研究
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随机引物PCR
随机引物 PCR一. 实验原理聚合酶链式反应( Polymerase chain reaction )简称 PCR ,它是一种 DNA 体外扩增技术。 1985
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Real time PCR 跟RT-PCR有什么区别
实时荧光定量PCR原理所谓实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量
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基因克隆策略与引物设计原则
1、功能基因克隆的基本策略① 根据已知的脊椎动物某一特定基因的氨基酸序列的保守区域设计简并引物,利用RT-PCR技术获得该基因的核心片断,将该片断分离纯化后与T
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减少PCR产物中引物二聚体的方法
1.从引物自身着手,重新设计引物,这是最根本解决这一问题的办法。2.可能模板有问题,模板浓度过小,适当加大模板量。3.Taq酶,引物,Mg2+浓度可能过高,可降
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一些供评比的PCR仪器生产商/品牌
PCR 技术现在已成为现代分子生物学实验工作的基础技术和有效工具,在医学、农业、检验检疫等领域中使用十分广泛。其核心设备-PCR仪经过不断改进,已经越来越完善和
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PCR反应模板的制备
PCR反应的关键因素主要有引物的选择与设计,酶的质量。模板的制备,在前二者都稳定可行的情况下,PCR模板的制备尤为重要。模板处理方法的选择及操作人员的基本技能,
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荧光定量PCR:简介、原理、应用
荧光定量PCR简介荧光定量PCR检测技术诞生至今已10多年的时间,而其应用一直都没广泛展开,究其原因,无外乎受制于相关仪器、试剂和技术的发展。近期,尤其是08年
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什么是TAIL-PCR(thermal asymmetric interlaced PCR)
在分子生物学研究中,基因克隆和分子杂交的探针制备等操作常需分离与已知DNA序列邻近的未知序列,TAIL-PCR又叫热不对称交错PCR,能够较好地解决上述难题。该