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实时定量PCR的原理、探测化学物质及探针优化(一)
1. 实时PCR原理对扩增产物进行可重复性的定量长期以来一直是科学家和研究者的目标。传统的方法需要对终产物进行凝胶电泳分析。这种方法可以确定目的产物和竞争产物的
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实时荧光定量PCR的研究进展及其应用
多聚集链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术多聚集链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术发明
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real time PCRTaqman探针设计、实时多重PCR探针的选择、引物的设计及评价
一、实时荧光Taqman 探针设计总原则:探针选择要保守,引物选择要保守,因此必须找一段100-200bp相对要保守的片段来设计引物与探针。即real-time
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Real time PCR经验 从RNA的提取到PCR
一 :引物的设计引物的设计对于这个实验至关重要,因为real time pcr的检测灵敏度比较高,所以相应的对引物设计的要求就很高。普通的要求规则大家都知道,还
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定量PCR常见问题及对策
Q1.无CT值(信号)出现1.反应循环数不够。一般都要在35个循环以上,可根据实验情况增加循环(如至45cycles),但高于45个循环会增加过多的背景信号。2
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高质量RNA的标准
real time RT-qPCR 是检测样本中特定基因表达量的有效方法,包含逆转录步骤和定量PCR步骤。好的开始是成功的一半,获得高质量的、能正确反应样品中转
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实时定量PCR完全手册
方法简介所谓的实时荧光定量 PCR 就是 通过对 PCR 扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析。在实时荧光定量 PCR
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比一比 谁能做更好的荧光定量PCR
PCR无疑是目前最常用的实验室技术之一,而由PCR发展出来的定量PCR技术,不单有PCR的快速灵敏,还以专一性更高、可实时监控、可重复精确定量等优势而日益受到重
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从菜鸟到高手—荧光定量qPCR手册
从菜鸟到高手—荧光定量qPCR手册关键词: 荧光定量PCR qPCR 百泰克生物来源: 互联网从菜鸟到高手—荧光定量qPCR手册 本文从real-time qP
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Real-time PCR实验攻略
北京协和医学院阜外心血管病医院心外科心血管病国家重点实验室吴益和分享实验中必须坚持的一些好习惯1. 加入试剂之前,把它混匀一下,以免放置时间长了浓度不均。2.
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PCR操作规程及污染的监测与防治
PCR与定量PCR反应最大的魅力是扩增能力与高灵敏度,但易污染一直是困扰各实验室的大问题,极微量的污染就可能造成假阳性反应,破坏实验结果。如何监测与防止PCR污
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QPCR的基础知识
问:什么是QPCR?答:QPCR的英文全名是Real-time Quantitative PCR Detecting System。即实时荧光定量核酸扩增检测系
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real-time PCR技术的原理及应用
一、实时荧光定量PCR原理(一)定义:在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法 。(
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荧光定量PCR:简介,原理,应用
荧光定量PCR简介 荧光定量PCR检测技术诞生至今已10多年的时间,而其应用一直都没广泛展开,究其原因,无外乎受制于相关仪器、试剂和技术的发展。近期,尤其是08
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实时荧光定量PCR具体实验步骤
1 样品RNA的抽提①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的氯仿,盖紧管盖。手动剧烈