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DNA 酶 I 足迹分析法实验-DNA酶I足迹分析法
材料与仪器含有DNA结合位点的质粒DNA适当的限制性内切核酸酶 100%乙醇及冰冷的70%乙醇 TE缓冲液 [α-32P] dNTP (3000〜6000 Ci
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编码 DNA 结合蛋白的 cDNA 克隆的检测、纯化和鉴定-从重组溶源菌中制备粗提物鉴定DNA结合蛋白的活性
材料与仪器大肠杆菌 Y1089含有或不含10 mmol L MgCl2的LB培养液 1010pfu mLλgtU重组噬菌体液 1 mol L IPTG 抽提缓冲
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编码 DNA 结合蛋白的 cDNA 克隆的检测、纯化和鉴定-用盐酸胍进行干燥膜的变性/复性循环
材料与仪器HEPES结合缓冲液步骤1) 按基本方案步骤1〜15进行。2) 将平皿在4℃冷却10 min。用针扎孔标记各膜的位置。小心地揭起膜,室温下在空气中瞭干
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编码 DNA 结合蛋白的 cDNA 克隆的检测、纯化和鉴定-用位点识别DNA筛选λgtll表达文库
材料与仪器含有多个串联拷贝识别位点的、缺乏识别位点的(或含识别位点突变的)pUC重组质粒DNA限制性内切核酸酶EcoRI及HhdIII 1 mol L Tris
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用克隆化基因在体外合成的蛋白质分析 DNA-蛋白质相互作用
简介体外合成的蛋白质对于测定一个克隆的基因是否编码一个特异的DNA结合蛋白, 以及分析DNA-蛋白质相互作用都是极为有用的。为了检测DNA的结合能力,可将标 记
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序列特异性 DNA 结合蛋白的亲和层析纯化实验-DNA亲和层析法
材料与仪器制备性的DNA亲和层析树脂缓冲液Z或其他柱缓冲液(如缓冲液Ze或TM) 配制时含不同的KCl浓度(从缓冲液 Z 0.1 mol L KCl 至缓冲液
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序列特异性 DNA结合蛋白的亲和层析纯化实验-用制备性凝胶电泳纯化寡核苷酸
材料与仪器40% (m V) 19:1丙烯酰胺 双丙烯酰胺 16%聚丙烯酰胺凝胶 10TBE缓冲液 尿素 10% (m V)过硫酸铵 TEMED 甲酰胺加样缓冲
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序列特异性 DNA 结合蛋白的亲和层析纯化实验-DNA偶联于溴化氰活化的琼脂糖上
材料与仪器盐酸 用前新鲜配制 溴化氰活化 Sepharose 4B (Pharmacia Biotech)步骤1) 制备标记的被连接的寡核苷酸探针2) 称出3
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序列特异性 DNA 结合蛋白的亲和层析纯化实验-DNA亲和介质的制备
材料与仪器两种带有结合位点的合成寡核苷酸各440μgTE缓冲液 pH 7.8 10T4噬菌体多核苷酸激酶缓冲液 20 mmol L ATP (钠盐) pH 7.
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将 DNA 导入酵母细胞实验-单链高分子质量载体DNA的制备
材料与仪器待转化的酵母菌株 DNA (从鲑鱼精巢制备的DNA III型钠盐 Sigma #D1626) lTE缓冲液 pH 8.0 缓冲液平衡酚 1: 1 (W
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将 DNA导入酵母细胞实验-电穿孔转化
材料与仪器待转化的酵母菌株 1 mol L 二硫苏糖醇(DTT 过滤除菌并储存在-20℃) 1 mol L山梨醇 山梨醇选择平板电穿孔仪:如Bio-Rad公司的
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将 DNA 导入酵母细胞实验-乙酸锂转化
材料与仪器待转化的酵母菌株YPD培养基 YPAD培养基:添加30 mg L腺嘌呤半硫酸的YPD培养基 高纯无菌水 l0TE缓冲液 pH 7.5 无菌10乙酸锂储
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荧光素酶的测定实验
简介以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(Firefly Luciferase)活性的原理荧光素 4-单氧酶(ATP-水解)提取于萤火虫,P
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电极缓冲液中甘氨酸的作用
甘氨酸同Tris(三羟甲基氨基甲烷)一起组成电泳缓冲液中的缓冲对,可以稳定电泳过程中的PH值。在SDS-PAGE不连续电泳中,制胶缓冲液使用的是Tris-HCL
甘氨酸