大鼠胚胎冻存保存方法

冻存（cryopreservation）是生物材料保存的主要方法之一。利用冻存技术将胚胎、配子或卵巢置于-196℃液氮中低温保存，可以使胚胎、配子或卵巢暂时脱离生长状态而将其生理特性保存起来，这样在需要的时候再复苏用于实验。适度地保存一定量的胚胎、配子或卵巢，可以防止因意外事件而造成丢种，起到了胚胎、配子或卵巢的保种作用。除此之外，还可以利用冻存的形式来购买、寄赠、交换和运送某些特殊基因型的胚胎、配子或卵巢。

材料与仪器

器材：

①冻存管

②无菌移液枪、枪头

③超低温冰箱

试剂：

①材料：大鼠胚胎

②DMSO

③DAP213溶液

④液氮

步骤

大鼠胚胎冻存的基本过程可分为如下几步：

1.将形态正常的大鼠胚胎移入1 mol／L的DMSO液滴中，每个液滴转移40～50个胚胎，让其自然沉降到液滴底部。

2. 再用10 μl的移液器吸取5 μl含有全部胚胎的DMSO，转移到冻存管内。

3. 在0 ℃恒温器中平衡5分钟；加入DAP213溶液，继续在0 ℃条件下平衡5分钟。

4. 投入液氮保存。