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噬菌体文库的铺平板和转移实验基本方案
材料与仪器噬菌体琼脂糖 LB NaOH SSC Tris·Cl硝酸纤维素膜 培养箱步骤1. 通过系列等比稀释滴定噬菌体文库的滴度。 2. 重组噬菌体与铺平板
2024-06-13 19 -
粘粒及质粒文库的铺平板和转移实验基本方案
材料与仪器质粒LB NaOH 氯霉素 Tris·Cl NaCl硝酸纤维素滤膜 离心机 布氏漏斗 培养箱步骤1. 在含抗生素的平板上，通过系列等比稀释确定质粒和
2024-06-13 22 -
使用合成核苷酸作探针实验（在绿化四甲胺中（TMAC）杂交）
材料与仪器寡核苷酸LB SDS EDTA TMAC水浴锅 离心机 培养箱 尼龙膜步骤1. 按“在氯化钠/柠檬酸钠中杂交”介绍的方法处理已影印细菌菌落的滤膜。2
2024-06-13 24 -
使用合成核苷酸作探针实验（在氯化钠/柠檬酸钠中杂交）
材料与仪器核苷酸SSC 焦磷酸钠 SDS培养箱 水浴锅步骤1. 制备双份的转印细菌菌落或噬斑的硝酸纤维素滤膜（处理和干烤过）。2. 在室温下用3 SDS
2024-06-08 16 -
噬菌体克隆的纯化实验基本方案
材料与仪器噬菌体LB 顶层琼脂糖 氯仿 SM MgSO4培养箱 牙签 硝酸纤维素膜步骤1. 在直径82 mm LB平极上倒入含200 μl 宿主菌的3 ml
2024-06-08 29 -
粘粒和质粒克隆的纯化实验基本方案
材料与仪器质粒LB 抗生素涂布棒 硝酸纤维滤膜步骤1. 通过原位杂交检测硝酸纤维索滤膜上影印菌落。2. 用无菌的牙签挑出阳性克隆，接种到含适当抗生素的1 m
2024-06-08 20 -
变性凝胶电泳实验（含甲酰胺的测序胶）
原理聚丙烯酰胺凝胶加人甲酰胺可以使造成条带压缩的测序产物的二级结构不稳定。材料与仪器DNA甲酰胺 甲醇 乙醇 TEMED SDS电泳仪步骤1. 按基本方案步骤
2024-06-08 20 -
变性凝胶电泳实验（电解质梯度测序胶）
原理通过简单地提高下槽缓冲液的盐浓度，使凝胶底部的离子強度得以提高，在电泳过程中，盐离子可以电泳进入凝胶并产生重复性好的及有效的梯度。材料与仪器DNATBE 乙
2024-06-08 27 -
变性凝胶电泳实验（缓冲液梯度测序胶）
原理在本实验方案，测序胶底部的缓冲液浓度大于其顶部浓度，使得短寡核苷酸片段（胶底部）的迁移率相对比长寡核苷酸（顶部）的迁移率要慢一些，这洋凝胶可电泳更长的时间而
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变性凝胶电泳实验基本方案
材料与仪器DNA乙醇 异丙醇 二甲基二氯硅烷 TEMED 变性丙烯酰胺溶液 SDS电泳仪 注射器 巴斯德吸管 干胶机步骤1. 制作每块凝胶时，首先要用肥皂及水
2024-06-08 20 -
寡核苷酸介导的诱变实验基本方案
材料与仪器大肠杆菌PEG TE ATP 寡核苷酸诱变引物 T4多核苷酸激酶 EDTA SSC水浴锅 电泳仪 培养箱步骤1. 将一个单链噬菌体产生的噬斑转移至含
2024-06-08 21 -
简并寡核苷酸诱变实验（小段DNA序列中产生大量突变）
材料与仪器大肠杆菌DNA聚合酶 dNTP 甘油 NaCl EDTA SDS 无水乙醇水浴锅 离心机 分光光度计步骤1. 设计寡核苷酸，其3‘端含有由8个核苷酸
2024-06-08 25 -
基因合成实验
原理基因合成是指在体外人工合成双链DNA分子的技术，与寡核苷酸合成有所不同：寡核苷酸是单链的，所能合成的最长片段仅为100nt左右，而基因合成则为双链DNA分子
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区域特异性诱变
原理可在长达3‘的克隆化DNA片段上产生大量的随机分布的核苷酸替换突变，在将DNA克隆到一个可用来分离单链DNA的载体后，用各种可造成特定碱基损伤的化学试剂处理
2024-06-08 21 -
定点诱变实验（利用PCR引物点突变）
材料与仪器DNADNA聚合酶 klenow 限制性内切酶水浴锅 离心机 培养箱步骤1. 制备模板（见基本方案，步骤1和2） 2. 合成和纯化寡核苷酸引物并对
2024-06-08 22
