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PI（PropidiumIodide 碘化丙啶）染色
原理荧光显微镜观察1．收集细胞，PBS 洗涤细胞一次，2000 rpm 离心 5 分钟，用 PBS 重悬细胞，调整细胞浓度约为 106 个/ml；2．取 100 μl 细胞悬液，加入 2-10 μl ...
2021-07-28 -
胎牛血清--细胞培养的困境
自从第一个在青蛙淋巴液中维持青蛙神经纤维的体外细胞培养实验以来，科学家们一直在寻找最佳培养基成分。多年来，开发了动物源性培养基和人工培养基。人工培养基的例子有Eagles培养基及其改良的Eagles培...
2021-07-28 -
无血清培养基(Serum-Free Media)
通常，动物细胞的生长均有赖于血清的存在，在普通培养基中，如不加血清，绝大部分细胞不能增殖。目前，血清培养基中通常添加的比较好的血清是牛血清。经研究发现细胞培养中使用牛血清存在污染外源病毒和致病因子的风...
2021-07-28 -
漫谈培养基开发史（二）
前言培养基从含血清到无血清经历了几十年的发展，但从无血清到化学成分确定也就用了十年不到的时间，这得益于蛋白抗体药逐渐上市，通过培养基开发以提高产物表达水平的需求日益显著。在1997-2013年间，前几...
2021-07-28 -
漫谈培养基发展史（一）
细胞培养基开发半个多世纪，一代代科学家卓绝努力实现了一个个看似不可能的技术突破，期间江湖上也有许多轶事。时间轴上看培养基开发可以分三个阶段：1.1957-1997（从血清到无血清）；2.1998-20...
2021-07-28 -
细胞表型检测之细胞凋亡（Hoechst染色 + PI染色 + TUNEL 染色 + Annexin V-PI 双染）
文章目录1. 细胞凋亡2. 检测细胞凋亡：Hoechst 染色3. 检测细胞凋亡：PI 染色4. 检测细胞凋亡：TUNEL 染色5. 检测细胞凋亡：Annexin V-PI 双染1. 细胞凋亡细胞要增...
2021-07-28 -
细胞铁染色实验
原理骨髓内的铁蛋白及含铁血黄素（细胞外铁）和幼稚红细胞的铁粒（细胞内铁）在盐酸环境下与亚铁氰化钾作用生成亚铁氰化铁，即普鲁士蓝反应．材料与仪器盐酸溶液 亚铁氰化钾溶液 碱性复红贮存液 复染应用液 甲醛...
2021-07-28 -
小心冰激凌里的"杀人菌"——李斯特菌
每当说起“食品安全”，你的脑海中可能会浮现出这么几个关键词：添加剂、地沟油、重金属、农药残留等等。但你是否知道，食品安全最大的威胁其实是细菌。 随着夏天的到来，冰淇淋开始进入销售旺季。冰淇...
2021-07-28 -
免疫细胞化学ICC
材料与仪器【材料】样品， 【试剂，试剂盒】冷甲醇、丙酮，冷 PBS，Hoechst 或 DAPI（DNA 染色剂）， BSA ，Triton X-100步骤1. 固定 1) 冷甲醇、丙酮固定样...
2021-07-28 -
苏木素-伊红染色实验（HE 染色）
原理HE 染色（Hematoxylin-Eosin staining）即苏木精-伊红染色，是病理组织切片最常用的染色技术。主要使用苏木精和伊红这两种染液，其中苏木精碱性染液为蓝色，可以将组织的酸性结构...
2021-07-28 -
大肠菌群平板计数法
本法参照国标GB 4789. 3-2010规定的大肠菌群测定方法第二法。⒈检验程序见图3-7 ⒉原理样品先经过VRBA琼脂平板的筛选，因其中含有胆盐和结晶紫，可以很好的抑制革兰氏阳性菌的生长，乳糖可以...
2021-07-28 -
用比浊法测定大肠杆菌的生长曲线
原理将一定数量的细菌，接种于适宜的液体培养基中，在适温下培养，定时取样测数，以菌数的对数为纵坐标，生长时间为横坐标，作出的曲线称为生长曲线。该曲线表明细菌在一定的环境条件下群体生长与繁殖的规律。一般分...
2021-07-28 -
微孔滤膜过滤除菌实验
简介过滤除菌是通过机械作用滤去液体或气体中细菌的方法。根据不同的需要选用不同的滤器 和滤板材料。此法除菌的最大优点是可以不破坏溶液中各种物质的化学成分，但由于滤量有限，所以一般只适用于实验室中小量溶液...
2021-07-28 -
何时高压灭菌 何时过滤灭菌
细胞培养的核心之一是无菌操作,那么，菌从何而来?从人、物品以及环境中来。使用一次性、已灭菌的实验工具，能有效降低污染引入的风险，但总有一些工具、总有一些环节是需要反复使用的。而这就需要进行清洁和灭菌。...
2021-07-28 -
滤纸保藏法
原理微生物具有容易变异的特性，因此，在保藏过程中，必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态，才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。 选用优良菌株，根据生理生化特征隔绝空气使其处于休眠...
2021-07-28
