细菌奈瑟染色法
原理芽胞具有高度的折光性,外膜致密,渗透性低,故普通染色法不易使其着色,芽胞染色法是根据芽胞既难以着色,而一旦着色又难以脱色的特点设计的,所有芽胞染色法都基于同
原理
芽胞具有高度的折光性,外膜致密,渗透性低,故普通染色法不易使其着色,芽胞染色法是根据芽胞既难以着色,而一旦着色又难以脱色的特点设计的,所有芽胞染色法都基于同一个原则:采用着色力强的染料,并加热以促进标本着色,然后使菌体脱色,而芽胞上的染料仍保留,经复染后,菌体和芽胞呈现不同的颜色。
材料与仪器
细菌样品
美兰 95%酒精 冰醋酸 结晶紫 黄叱精 奈瑟染液
显微镜
美兰 95%酒精 冰醋酸 结晶紫 黄叱精 奈瑟染液
显微镜
步骤
1、材料
(1)染液甲
第一液:美兰1g,95%酒精30ml,冰醋酸50ml,蒸馏水100ml。
第二液:结晶紫1g, 95%酒精10ml, 蒸馏水300ml。
以上第一液二份,与第二液一份混合之。
(2)染液乙,黄叱精1或2g,热蒸馏水300ml,待溶解后过滤。
2、染色法
(1)涂片按常规法固定后,滴加奈瑟染液甲液数滴于涂片上,15~30 Sec,水洗。
(2)用奈瑟染液乙液复染10~30秒钟。
(3)迅速用水洗,吸干、镜检。
3、结果
菌体呈鲜明黄色、异染颗粒呈深紫兰色。
注意事项
1. 涂片按照常规方法要固定好,防止脱落。
2. 使用显微镜时需要调节好物镜与目镜。
常见问题
制成涂片后,用两份溶液I和一份溶液I的混合液,染70秒钟,水洗.再染以溶液,再水洗,吸乾后镜检,菌休菊橙色,异染粒深蓝色。