聚丙烯酰胺凝胶中DNA的放射自显影检测
原理丙烯酰胺凝胶电泳分离的放射性 DNA 条带可用放射自显影的方法检测。含有放射性 DNA 的聚丙烯酰胺分析凝胶，在放射自显影前通常要固定和干燥。然而，若要从凝
原理
丙烯酰胺凝胶电泳分离的放射性 DNA 条带可用放射自显影的方法检测。含有放射性 DNA 的聚丙烯酰胺分析凝胶，在放射自显影前通常要固定和干燥。然而，若要从凝胶中回收放射性 DNA 条带，则不应固定和干燥。
材料与仪器
乙酸
聚丙烯酰胺凝胶 市售凝胶干燥机 塑料筛 放射性墨水或化学发光标准参照物 滤纸
聚丙烯酰胺凝胶 市售凝胶干燥机 塑料筛 放射性墨水或化学发光标准参照物 滤纸
步骤
一、材料
1. 缓冲液和溶液
乙酸
2. 凝胶
聚丙烯酰胺凝胶
3. 专用设备
市售凝胶干燥机（可选或不选）
塑料筛（筛目大小为 1 cm，园艺和五金商店有售）（可选或不选)
放射性墨水或化学发光标准参照物
Whatman 3 MM 滤纸
二、方法
1. 将凝胶及其附着的玻璃板于 7% 乙酸中浸 5 min。小心地从固定液中拿起玻璃板以取出凝胶。
2. 去离子水短暂漂洗凝胶，用一叠 Kimwipes 纸蘸去凝胶表面多余的液体。
3. (可做或不做）将凝胶放在 Whatman 3 MM 纸上，用市售凝胶干燥机干燥。
4. 将凝胶及支撑的玻璃板包在 Saran Wrap 膜中，用梳子宽的一端或折叠的 Kimwipe 纸除去 Saran Wrap 膜中的气泡或皱褶。
5. 将放射性墨水或化学发光标准参照物标记的黏性小标签贴于 Saran Wmp 膜表面，以便对准凝胶与胶片的位置。用透明胶带覆盖放射性墨水标签，以免污染胶片盒和增感屏。
6. 将凝胶倒置，按以下步骤对 X 射线片（如 Kodak XAR-5 或同类产品）曝光：
(1) 在暗室里，用胶带将密封的凝胶与裁成玻璃板大小的一张 X 射线片粘在一起。
(2) 用不透光的铝箔将凝胶与胶片包好。
(3) 于室温或 -70℃ 曝光合适的时间，增感屏使用与否均可。
(4) 按制造商的建议显影、定影和干燥 X 射线胶片。
1. 缓冲液和溶液
乙酸
2. 凝胶
聚丙烯酰胺凝胶
3. 专用设备
市售凝胶干燥机（可选或不选）
塑料筛（筛目大小为 1 cm，园艺和五金商店有售）（可选或不选)
放射性墨水或化学发光标准参照物
Whatman 3 MM 滤纸
二、方法
1. 将凝胶及其附着的玻璃板于 7% 乙酸中浸 5 min。小心地从固定液中拿起玻璃板以取出凝胶。
2. 去离子水短暂漂洗凝胶，用一叠 Kimwipes 纸蘸去凝胶表面多余的液体。
3. (可做或不做）将凝胶放在 Whatman 3 MM 纸上，用市售凝胶干燥机干燥。
4. 将凝胶及支撑的玻璃板包在 Saran Wrap 膜中，用梳子宽的一端或折叠的 Kimwipe 纸除去 Saran Wrap 膜中的气泡或皱褶。
5. 将放射性墨水或化学发光标准参照物标记的黏性小标签贴于 Saran Wmp 膜表面，以便对准凝胶与胶片的位置。用透明胶带覆盖放射性墨水标签，以免污染胶片盒和增感屏。
6. 将凝胶倒置，按以下步骤对 X 射线片（如 Kodak XAR-5 或同类产品）曝光：
(1) 在暗室里，用胶带将密封的凝胶与裁成玻璃板大小的一张 X 射线片粘在一起。
(2) 用不透光的铝箔将凝胶与胶片包好。
(3) 于室温或 -70℃ 曝光合适的时间，增感屏使用与否均可。
(4) 按制造商的建议显影、定影和干燥 X 射线胶片。
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