菌种保藏

摘要： 基因克隆菌种的保藏一般采用冷冻保藏的方法.一般是将菌种于-20℃或-80℃以下的温度保藏,通过冷冻,使菌体代谢活动停止.在保藏的时候,通常在培养物中加入一定的冷冻保护剂（如甘油）.

基因克隆菌种保藏

1、实验简介

基因克隆 菌种 的保藏一般采用冷冻保藏的方法.一般是将菌种于-20℃或-80℃以下的温度保藏,通过冷冻,使菌体 代谢 活动停止.在保藏的时候,通常在培养物中加入一定的冷冻保护剂（如甘油）.

实验中使用的主要仪器：

超净工作台 -20℃柜式冰箱 -80℃超低温冰箱

2、实验前准备

超净工作台照射紫外灭菌30分钟后,点燃里面的酒精灯,用酒精棉球擦拭台面,保证严格无菌操作.

3、菌种保存

过夜培养的 大肠杆菌 都要先进行菌种保存已被后用.取数个1.5ml 灭菌的EP管,做好标记,先加入灭过菌的甘油,再加入菌液混匀,最终制备成15%甘油菌；为了避免外来菌种的污染,一般最后要用封口膜对EP管封闭.