四、液体和半固体接种法
1)液体接种法
包括从外面菌种接入培养液,或从液体菌种接入液体培养液,两种情况都可以用接种环接种。但在培养量比较大的情况下,液体接种宜采用移液管接种,要求无菌操作。
左手持试管,右手将烧灼过的接种环伸入菌种管,待冷却后,取菌液一环,立即移入培养基管中,在接近液面的管壁上轻轻研磨,然后将试管稍倾斜,并沾取少许液体调和,使菌液混合于培养基中(图5,A)
2)半固体培养基接种法
将烧灼过的接种针插入菌种管冷却后,沾取菌液少许,立即垂直插入半固体培养基的中心至接近于管底处,但不可直刺至管底,然后循原路退出(图5,B)。管口通过火焰,塞上棉塞,接种针烧灼灭菌后放下。
将上述已接种好的培养物,37℃度恒温箱内培养,24小时后取出观察结果。
图5
五、涂布接种法
用无菌移液管吸取菌悬液0.1mL,滴加于培养基平板上,右手持无菌涂布棒,左手拿培养皿,并用拇指将皿盖打开一缝,在火焰旁右手持涂布棒与培养皿平板表面将菌液自平板中央均匀向四周涂布扩散,切忌用力过猛将菌液直接推向平板边缘或将培养基划破。接种后,将平板倒置于恒温箱中,培养观察。