PI（PropidiumIodide 碘化丙啶）染色

荧光显微镜观察

1．收集细胞，PBS 洗涤细胞一次，2000 rpm 离心 5 分钟，用 PBS 重悬细胞，调整细胞浓度约为 106 个/ml；

2．取 100 μl 细胞悬液，加入 2-10 μl PI 染液，轻轻混匀；

3．4℃ 避光放置 5 min 后，滴加于载玻片上，加盖玻片；

4．荧光显微镜检测。

流式检测：

1．收集细胞，PBS 洗涤细胞一次，2000 rpm 离心 5 分钟，用 PBS 重悬细胞，调整细胞浓度约为 106 个/ml；

2．500 μl 细胞悬液中加入 5 μl PI 染液；

3．4℃ 避光放置 30 min；

4．流式细胞仪检测。

【器材】一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，离心机

【试剂】PI 染色液

【材料】细胞

荧光显微镜观察

1．收集细胞，PBS 洗涤细胞一次，2000 rpm 离心 5 分钟，用 PBS 重悬细胞，调整细胞浓度约为 106 个/ml；

2．取 100 μl 细胞悬液，加入 2-10 μl PI 染液，轻轻混匀；

3．4℃ 避光放置 5 min 后，滴加于载玻片上，加盖玻片；

4．荧光显微镜检测。

流式检测：

1．收集细胞，PBS 洗涤细胞一次，2000 rpm 离心 5 分钟，用 PBS 重悬细胞，调整细胞浓度约为 106 个/ml；

2．500 μl 细胞悬液中加入 5 μl PI 染液；

3．4℃ 避光放置 30 min；

4．流式细胞仪检测。

●本染色液用于细胞染色分析，也可用于石蜡切片、冰冻切片、细胞涂片的检测。石蜡切片用常规方法脱蜡、分化、冰冻切片用冰丙酮固定后检测。以下以培养细胞的荧光显微镜检测为例，细胞染色可用预冷的 70% 的乙醇固定，4℃，1-2 小时，也可不固定，其他方法请参阅相关资料。

● 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。

●染色后请尽快检测。

●染色时间根据不同样本的实际染色结果做相应调整。

● PI有毒，操作时要戴上手套。

● 流式检测细胞凋亡时，其 DNA 可染性降低被认为是凋亡细胞的标志之一，但这种 DNA 可染性降低也可能是因为 DNA 含量的降低，或者是因为 DNA 结构的改变使其与染料结合的能力发生改变所致。在分析结果时应该注意。