克氏假单胞菌

 一、菌种简介 

1、菌种名称：克氏假单胞菌  Pseudomonas knackmussii

2、分离基物：土壤/椰子树腐烂芯覆土

3、具体用途：研究

二、斜面或平板:

1、拿到安瓿管中平板形式提供的菌种后请及时使用，成置4-15度条件下暂存，一般不超过一周，我们随附的空白平板供您应急.

2、若是多次使用，应制做成甘油管，放置在使-70℃至80℃冰箱或液氮中保藏。
方法见下。

三、冻干管:

1、将安瓿管上部(非样品一端)在酒精灯上先均匀烧均表面，然后再烧灼上部一侧；

2、灭菌水棉球点烧灼部位，出现裂纹后(注意安瓯管不要倒置)；用灭菌镊子敲开:

3.加入液体培养基约100uL(注意管壁可能会很烫，可冷却后再加液)，打匀取少许接种至适宜培养基。

附: -80℃和液氮保藏方法:

(1) 培养:将菌种接种于合适培养基，培养基用固体或液体均可，对生长较快(如大部分弧菌、希瓦氏菌)和生长较慢的菌株用液体培养基培养比较好。培养时期掌握在对数生长期或对数生长后期。

(2)收集菌体:液体培养时，离心弃去上清液；以平板或斜面培养时，刮取菌体。

(3)保护剂:20%甘油(或20%甘油+5%海藻糖保藏效果更好)灭菌。

(4)分装:将菌体与保护剂混匀，菌体用量不能太少，混匀后看上去要浑浊；分装到若干冻存管。

(5)降温:及时放冰箱，先放-20℃，1-2小时后转移至-70℃至-80℃。如放入液氨中保藏，须注意样品温度降至-40℃以下再放。
(6)活化: 从冰箱或液氮中取出甘油管后，立即放置在40C温水中摇晃使冰融化，约需50秒-100秒；吸取适量内容物至适宜培养基培养。

*也可从冰箱或液氮中取出后，用低温冰盒保温，牙签刮取少许冰接种至合适培养基，甘油管可再放回原处低温保藏(注意动作要快避免过度升温)。

四、常用培养基

1、培养基名称: 2216E

2216E培养基